兔ICAMelisa试剂盒
产品简介:
兔ICAM ELISA试剂盒是一类用于定量检测兔血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等生物样本中细胞间粘附分子（ICAM，包括ICAM-1、ICAM-2、ICAM-3、ICAM-4、ICAM-5等）含量的试剂盒。这些试剂盒基于双抗体夹心ELISA原理，能够高特异性、高灵敏度地检测ICAM家族成员，广泛应用于兔炎症反应、免疫调节、肿瘤及心血管等疾病机制研究。
英文名称 | Rabbit ICAM ELISA Kit | 产品类别 | Rabbit/兔Elisa试剂盒 |
货号 | A130081 | 规格 | 48T/96T |
检测原理
采用双抗体夹心法：用抗兔ICAM特异性抗体包被酶标板，样本中的ICAM与抗体结合后，加入酶标二抗，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物，催化底物显色，颜色深浅与ICAM浓度成正比。
典型组成
预包被ICAM抗体的酶标板
ICAM标准品
酶标抗体（如HRP标记）
样本稀释液
洗涤液
显色底物（TMB）
终止液
操作步骤
样本准备：血清、血浆或细胞上清等，建议做复孔并平衡至室温。
加样：加入标准品和待测样本，37℃孵育1-2小时。
洗涤：洗板3-5次，去除未结合物质。
加酶标二抗：37℃孵育45-60分钟。
显色与终止：加入底物避光反应，终止液终止反应。
读数：酶标仪450 nm测定吸光度，根据标准曲线计算ICAM浓度。
重要注意事项
严格按说明书操作，避免交叉污染和非特异性结合。
样本避免反复冻融，未用完的板条密封冷藏（2-8℃）保存。
不同批号组分不可混用，标准品建议一次性使用。
血浆、血清及组织样本需规范处理，避免溶血和杂质干扰。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”？
A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗？
A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？
A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
关键字： 兔;ICAM ;ELISA试剂盒;
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