产品介绍：
小鼠抗KLH（匙孔血蓝蛋白）抗体ELISA试剂盒用于定量检测小鼠血清或血浆中的抗KLH抗体水平，常用于免疫学研究中评估小鼠的免疫反应。
产品名称 | 小鼠抗KLH抗体ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse KLH |
规格 | 48T/96T | 货号 | A117745 |
以下是关于该试剂盒的详细信息：
核心参数：
检测目标：抗KLH IgG或IgM抗体。
检测方法：酶联免疫吸附试验（ELISA），通常采用双抗体夹心法或间接法。
校准范围：常见范围为6.25至100 μg/mL。
灵敏度：可检测低浓度抗体，具体值取决于试剂盒设计。
特异性：针对小鼠抗KLH抗体，与其他抗体交叉反应性低。
样本类型：血清、血浆。
反应时间：通常为2-4小时，具体时间取决于实验步骤。
检测仪器：酶标仪（450nm波长）。
组成成分：
预包被微孔板：包被有KLH抗原，用于捕获样本中的抗KLH抗体。
标准品：已知浓度的抗KLH抗体，用于绘制标准曲线。
检测抗体：通常为HRP标记的抗小鼠IgG或IgM抗体，用于检测捕获的抗体。
底物溶液：如TMB，用于产生颜色反应，颜色深浅与抗体浓度成正比。
终止液：用于终止底物反应，稳定颜色。
洗涤缓冲液：用于洗涤未结合的成分，减少背景干扰。
封板膜：用于覆盖微孔板，防止蒸发和污染。
应用领域：
免疫反应研究：评估小鼠对KLH免疫后的抗体产生水平。
疫苗开发：监测疫苗诱导的免疫反应。
自身免疫疾病研究：研究自身免疫反应机制。
操作注意事项：
样本稀释：根据样本中抗体浓度进行适当稀释，确保检测值在标准曲线范围内。
温育时间与温度：严格控制温育时间和温度，确保反应充分且一致。
洗涤步骤：彻底洗涤微孔板，去除未结合的成分，避免假阳性结果。
试剂储存：按照说明书要求储存试剂，避免试剂失效。
主要优点缺点
维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高，特异性强，结果准确 可能存在交叉反应，易受干扰物影响
操作体验 流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测 步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测，长期看性价比尚可 单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量（如是否溶血）敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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