细胞发生凋亡时,一些DNA内切酶被激活,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA,产生180 bp-200 bp的DNA片段,断裂的DNA片段暴露出大量的粘性3'-OH 末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化作用下,与生物素(Biotin)-dUTP结合,随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin(Streptavidin-HRP)结合,最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而通过光学显微镜直接进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling, TUNEL)。
本试剂盒应用范围广,可用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。可选择性的检测凋亡细胞,而非坏死细胞或因辐照和药物治疗而造成的DNA链断裂的细胞。
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