产品介绍:

禽腺病毒D型(FADV-D)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种专门用于体外定性检测禽腺病毒D群(Fowl Adenovirus Group D)基因组DNA的分子诊断工具。
该试剂盒基于实时荧光定量PCR(qPCR)技术,主要用于鸡群中包涵体肝炎(IBH)和心包积水综合征(HHS)的早期快速诊断、鉴别诊断及流行病学调查。
产品名称 | 禽腺病毒D型(FADV-D)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3616 |
以下是关于该试剂盒的详细介绍:
检测原理与技术

该试剂盒通常采用TaqMan荧光探针法,通过特异性引物和探针靶向FADV-D的保守基因序列进行扩增和检测。
靶基因设计:
Hexon基因(六邻体蛋白): 用于检测,具有型特异性,能准确识别D群病毒。
Fiber-2基因(纤维蛋白): 部分试剂盒将其作为毒力标记进行检测。
反应机制: 在PCR扩增过程中,随着目标DNA序列的指数级扩增,TaqMan探针被酶切,释放出荧光信号(通常为FAM荧光素)。仪器实时监测荧光信号的变化,从而判断样本中是否存在FADV-D DNA。
内标对照: 高质量的试剂盒通常包含内源性内标(Internal Control),用于监控样本采集、核酸提取及PCR扩增过程是否正常,防止假阴性。
�� 核心性能指标

指标 参数 说明
检测样本 肝脏、心脏、脾脏、法氏囊、泄殖腔拭子 适用于多种临床病料
检测下限 10³ - 10⁴ copies/mL 灵敏度高,可检出低拷贝数病毒
特异性 >95% 不与禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)等交叉反应
检测时间 约1.5 - 2小时 含核酸提取及PCR扩增步骤
保存条件 -20℃ ±5℃ 避光防潮保存,避免反复冻融
�� 典型操作流程

样本采集: 采集病死禽的肝脏(包涵体肝炎病变)、心包积液、脾脏等组织,或泄殖腔拭子。
核酸提取: 使用试剂盒配套的DNA提取试剂(磁珠法或离心柱法)提取样本中的总DNA。
反应体系配制: 将提取的DNA模板、PCR反应液、酶混合物等按比例加入PCR反应管中。
上机扩增: 放入荧光定量PCR仪(如ABI 7500、Roche LightCycler等)中运行程序。
结果判读:
阳性: FAM通道出现典型的S型扩增曲线,且Ct值≤35-38(具体阈值视说明书而定),表明样本中存在FADV-D DNA。
阴性: 无扩增曲线,或Ct值>40。
�� 临床应用与意义

早期诊断: 在鸡群出现临床症状前或初期即可检测到病毒核酸,比血清学方法更早发现感染。
鉴别诊断: 禽腺病毒分为I群(含A-E型)、II群和III群。D型(FADV-D)主要引起包涵体肝炎和心包积水。该试剂盒能特异性区分D型与其他血清型(如引起呼吸道疾病的C型),为精准防控提供依据。
疫苗质量控制: 用于检测禽用活疫苗(如鸡胚源性疫苗)是否被FADV-D污染,确保疫苗使用的安全性。
⚠️ 注意事项

用途限制: 市场上大多数此类产品明确标注“仅用于科研”或“实验室专用”,不作为临床诊断的唯一依据。
防污染: PCR实验室必须严格分区(试剂准备区、样本制备区、扩增区),操作人员需穿戴一次性手套和口罩,防止气溶胶污染导致的假阳性。
结果解读: 阳性结果表明存在FADV-D感染,但需结合鸡群的临床症状(如肝脏肿大出血、心包积液)及病理变化进行综合判断。
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通用操作流程与注意事项:
1. 样本制备
使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA,需设置阳性、阴性对照。
关键点:避免交叉污染,阳性对照单独存放。
2. 反应体系配置
常规PCR:引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。
qPCR:需额外加入探针或染料。
3. 扩增程序
常规PCR:
预变性→循环扩增→延伸
qPCR:
预变性→循环扩增(荧光采集)
4. 结果判读
常规PCR:电泳观察条带大小(如阳性对照需出现预期条带)。
qPCR:Ct值≤35为阳性,阴性对照无信号。
关键字: 禽腺病毒D型 ;FADV-D ;检测试剂盒;荧光PCR法;
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