产品介绍:

禽腺病毒E型(Fowl Adenovirus serotype E, FAdV-E)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种专门用于检测禽腺病毒E型DNA的分子诊断工具。该病毒主要引起鸡的包涵体肝炎(Inclusion Body Hepatitis, IBH)和心包积水综合征(Hydropericardium Syndrome),对养禽业危害较大。
产品名称 | 禽腺病毒E型(FADV-E)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3617 |
1. 检测原理

该试剂盒基于实时荧光定量PCR技术(qPCR),通常采用TaqMan探针法或SYBR Green染料法。
靶标基因: 针对FAdV-E基因组中的保守序列设计特异性引物和探针。常见的靶标区域包括六邻体(Hexon)基因的高变区或100K蛋白基因,这些区域具有良好的血清型特异性,能有效区分E型与其他血清型(如引起心包积液的C4型)。
反应机制:
探针法: 反应体系中包含FAM荧光标记的特异性探针。若样本中存在FAdV-E DNA,扩增时探针被水解,释放荧光信号。
染料法: 使用SYBR Green染料结合双链DNA发光,通过熔解曲线分析(Melting Curve)来确认产物特异性。
内标质控: 优质试剂盒通常包含内参(IC),标记HEX/VIC荧光,用于监控样本提取和扩增是否成功,防止假阴性。
2. 产品特点

高特异性: 专门针对E型设计,与其他禽腺病毒血清型(如A、B、C、D)及常见禽类病原体(如NDV、IBV)无交叉反应。
高灵敏度: 最低检测限通常可达 10² - 10³ copies/mL,能够检测到极低浓度的病毒,有助于早期感染的发现。
快速高效: 检测全程约 2-3小时,远快于病毒分离培养(需鸡胚接种,耗时数天)。
3. 主要用途

临床诊断: 用于检测疑似感染鸡的肝脏、脾脏、肾脏或粪便样本,辅助确诊包涵体肝炎。
种源净化: 用于检测种蛋或雏鸡,剔除带毒种禽,阻断垂直传播。
疫苗质检: 用于检测活疫苗或灭活疫苗中是否存在FAdV-E的外源性污染。
4. 储存与使用注意事项

储存条件: 试剂盒需 -20℃ 避光保存,避免反复冻融(特别是酶制剂),有效期通常为12个月。
样本类型: 主要用于检测组织样本(肝、脾、肾)、全血或泄殖腔拭子。
操作规范: 必须在PCR分区实验室进行,严格防止扩增产物的气溶胶污染。
结果判读(参考值):
阳性: FAM通道扩增曲线呈典型“S”型,Ct值 ≤ 35(部分试剂盒设定为≤32或≤40,需参照说明书)。
阴性: 无扩增曲线,或Ct值 > 40。
灰区/可疑: Ct值在 35-40 之间,建议重复实验。若复测Ct值 < 40 且曲线呈S型,则判为阳性;否则判为阴性。
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通用操作流程与注意事项:
1. 样本制备
使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA,需设置阳性、阴性对照。
关键点:避免交叉污染,阳性对照单独存放。
2. 反应体系配置
常规PCR:引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。
qPCR:需额外加入探针或染料。
3. 扩增程序
常规PCR:
预变性→循环扩增→延伸
qPCR:
预变性→循环扩增(荧光采集)
4. 结果判读
常规PCR:电泳观察条带大小(如阳性对照需出现预期条带)。
qPCR:Ct值≤35为阳性,阴性对照无信号。
关键字: 禽腺病毒E型 ;FADV-E;检测试剂盒;荧光PCR法;
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