产品介绍:
甲型流感病毒H3亚型(IAV-H3)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 是一种专门用于体外定性或定量检测甲型流感病毒H3亚型(Influenza A Virus Subtype H3)核酸的分子诊断工具。
该试剂盒基于实时荧光定量RT-PCR技术(qRT-PCR),主要用于区分甲型流感病毒中的H3N2亚型。H3N2是季节性流感的主要流行株之一,也可由禽源病毒跨种传播引起,该试剂盒对于流感的精准分型、流行病学调查及临床用药指导具有重要意义。
产品名称 | 甲型流感病毒H3亚型(IAV-H3)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3636 |
以下是关于该试剂盒的详细介绍:
检测原理与技术
该试剂盒主要采用TaqMan荧光探针法,针对H3亚型病毒的特异性基因序列进行检测。
靶标基因: 引物和探针通常靶向甲型流感病毒血凝素(Hemagglutinin, HA)基因的H3亚型特异性保守区。部分试剂盒也会同时检测神经氨酸酶(Neuraminidase, NA)基因以确认N2亚型(即H3N2)。
技术原理: 由于流感病毒是RNA病毒,试剂盒采用一步法RT-qPCR。
逆转录: 反应体系中的逆转录酶将样本中的病毒RNA逆转录为cDNA。
扩增与检测: 在PCR扩增过程中,特异性探针(通常标记为FAM荧光素)被酶切,释放出荧光信号。仪器实时监测信号变化,从而判断样本中是否存在H3亚型病毒核酸。
多重检测: 高端试剂盒通常设计为双重或四重荧光检测系统,例如:
FAM通道: 检测H3亚型特异性基因。
VIC/HEX通道: 检测甲型流感通用基因(如M基因),确认是否为甲流。
ROX/Cy5通道: 检测内源性内标(如RNase P),监控采样质量。
�� 核心性能指标
指标 参数 说明
检测样本 咽拭子、鼻拭子、肺泡灌洗液、病毒培养物 适用于人及禽类样本
检测下限 1×10³ copies/mL 或 500 copies/mL 灵敏度高,可检出微量病毒
特异性 强 不与甲型H1N1、乙型流感、禽流感H5/H7等病毒发生交叉反应
检测时间 约1.5 - 2小时 含核酸提取及RT-PCR扩增步骤
保存条件 -20℃ ±5℃ 避光保存,避免反复冻融
�� 典型操作流程
样本采集: 采集疑似感染者的咽拭子、鼻拭子或肺泡灌洗液。
核酸提取: 使用试剂盒配套的病毒RNA提取试剂(磁珠法或离心柱法)提取样本中的总RNA。
反应体系配制: 将提取的RNA模板、PCR反应液、酶混合物等按比例加入PCR反应管中。
上机扩增: 放入荧光定量PCR仪(如ABI 7500、Roche LightCycler等)中运行程序。
结果判读:
阳性: FAM通道(H3特异性)出现典型的S型扩增曲线,且Ct值 ≤ 35-40,表明样本中存在甲型流感H3亚型病毒。
阴性: FAM通道无扩增曲线,或Ct值 > 40。
�� 临床与应用意义
精准分型: 在确诊为甲型流感的基础上,进一步区分是H1N1还是H3N2亚型,因为不同亚型的流行病学特征和致病力可能不同。
流行病学监测: 用于监测H3N2病毒在人群或禽类中的流行情况、变异趋势及跨种传播风险(如禽源H3病毒传人)。
临床用药指导: 虽然抗病毒药物(如奥司他韦)对甲流通用,但精准分型有助于评估病情严重程度及预后。
人畜共患病防控: H3亚型是人畜共患流感病毒的重要分支,该试剂盒可用于监测猪、禽等动物宿主中的H3病毒,防止大流行。
⚠️ 注意事项
用途限制: 市场上大多数此类产品明确标注“仅用于科研”或“实验室专用”,不作为临床诊断的唯一依据,购买时需注意产品说明。
防污染: PCR实验室必须严格分区(试剂准备区、样本制备区、扩增区),操作人员需穿戴一次性手套和口罩,防止气溶胶污染导致的假阳性。
结果解读: 阳性结果表明存在H3亚型病毒感染,但需结合患者的临床症状、流行病学史及其他检测结果进行综合判断。阴性结果不能完全排除感染,需结合临床表现复核。
PCR试剂盒的核心类型:
1. 常规PCR试剂盒
原理:通过引物扩增目标DNA片段,产物经琼脂糖电泳检测。
特点:操作简单、成本低,适用于定性检测(如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒)。
典型应用:动物病原体筛查。
2. 荧光定量PCR(qPCR)试剂盒
探针法(TaqMan):
利用特异性探针结合目标序列,荧光信号实时监测扩增过程。
优势:高特异性(如牛白血病病毒试剂盒)、宽线性范围(10²–10⁷拷贝/μL)。
染料法(SYBR Green):
染料嵌入双链DNA发光,成本较低,但需优化引物特异性。
3. 恒温扩增试剂盒
技术:LAMP、RPA等,无需热循环仪,适合现场检测。
公司正在出售的产品:
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关键字: 甲型流感病毒H3亚型;IAV-H3;检测试剂盒;荧光PCR法;
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