产品介绍:
高致病性禽流感H7亚型病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种专门用于检测高致病性禽流感病毒H7亚型(如H7N9、H7N7等)核酸的分子诊断工具。
H7亚型禽流感病毒属于甲型流感病毒,其中部分毒株(如H7N9)对家禽具有高致病性,且能突破种间屏障感染人类,引起严重的呼吸道症状甚至死亡。由于其公共卫生意义重大,早期、快速、准确的病原学检测对于疫情的防控至关重要。荧光PCR法因其高灵敏度、高特异性和快速的特点,是目前实验室检测H7亚型的首选方法。
产品名称 | 高致病性禽流感H7亚型病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3639 |
以下是关于该试剂盒的详细介绍:
1. 检测原理与技术
该试剂盒主要基于实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)技术,通常采用TaqMan探针法。
核心机制:
样本处理:从禽类的咽喉/泄殖腔拭子、组织(如脾、肺、气管)或环境样本(如污水、笼具擦拭物)中提取病毒RNA。
逆转录-PCR:利用逆转录酶将病毒RNA转化为cDNA,再进行PCR扩增。
双重/多重检测策略:为了提高检测效率和准确性,试剂盒通常设计为多重荧光PCR:
FAM通道(或类似):检测H7亚型特异性基因(通常是血凝素H7基因的保守区)。
HEX/VIC通道(或类似):检测甲型流感病毒通用基因(如M基因),用于确认样本中是否存在甲型流感病毒。
内标(Internal Control):监控样本提取和扩增过程是否正常,防止假阴性。
优势:通过一个反应即可同时确认是否为甲流,以及是否为H7亚型,大大提高了检测效率和准确性。
2. 试剂盒特点与性能
这类试剂盒专为高致病性禽流感防控设计,具有以下显著特点:
性能维度 描述
特异性 极高。引物和探针专门针对H7亚型设计,通常不会与H5、H9、H3等其他流感亚型,或新城疫病毒、传染性支气管炎病毒等发生交叉反应。
灵敏度 极高。最低检测限通常可达 1×10³ copies/mL,能有效检测出潜伏感染或低载量感染的禽群。
检测速度 快速。整个检测流程(含核酸提取)通常在 2-3 小时 内完成,为疫情的早发现、早处置争取时间。
临床/兽医价值 确诊金标准。是确诊H7亚型禽流感感染的确诊试验,也是进出口贸易中指定的检测方法之一。
3. 适用样本与应用场景
适用样本:
禽类样本:咽喉拭子、泄殖腔拭子、气管/肺组织、脾脏、法氏囊等。
环境样本:活禽交易市场、养殖场的笼具、污水、粪便、刀具表面擦拭物等。
人类样本:在公共卫生领域,用于检测疑似感染者的鼻咽拭子、痰液等(需使用临床批准的试剂盒)。
应用场景:
临床/现场诊断:对出现呼吸道症状、产蛋下降或死亡的禽群进行确诊。
监测与净化:活禽交易市场的常规监测、种禽场的净化监测。
流行病学调查:追踪H7亚型病毒的来源和传播路径。
4. 操作注意事项
生物安全:H7亚型禽流感病毒(特别是高致病性毒株)具有潜在的感染风险,样本处理必须在相应的生物安全级别(如BSL-2或BSL-3)实验室中进行。
防污染:荧光PCR极其灵敏,必须严格分区操作(试剂准备区、样本处理区、扩增区),移液器需带滤芯吸头,防止气溶胶污染。
结果解读:
H7阳性:FAM通道有扩增曲线,且Ct值小于设定的阈值(如Ct<37或40),同时内标正常。
甲型流感阳性但H7阴性:HEX通道有扩增,但FAM通道无扩增,提示可能是其他亚型(如H5、H9等)。
阴性:无扩增曲线,或Ct值大于阈值。
PCR试剂盒的核心类型:
1. 常规PCR试剂盒
原理:通过引物扩增目标DNA片段,产物经琼脂糖电泳检测。
特点:操作简单、成本低,适用于定性检测(如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒)。
典型应用:动物病原体筛查。
2. 荧光定量PCR(qPCR)试剂盒
探针法(TaqMan):
利用特异性探针结合目标序列,荧光信号实时监测扩增过程。
优势:高特异性(如牛白血病病毒试剂盒)、宽线性范围(10²–10⁷拷贝/μL)。
染料法(SYBR Green):
染料嵌入双链DNA发光,成本较低,但需优化引物特异性。
3. 恒温扩增试剂盒
技术:LAMP、RPA等,无需热循环仪,适合现场检测。
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关键字: 高致病性禽流感H7亚型病毒;检测试剂盒; 荧光PCR法;
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