弓形虫(TOX)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

产品介绍：

弓形虫（Toxoplasma gondii，简称TOX）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）是一种用于体外定性检测临床样本中弓形虫DNA的分子诊断产品。该试剂盒基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，通过检测弓形虫特有的DNA序列，为弓形虫感染的诊断提供直接的病原学证据。

1. 检测原理品

该试剂盒主要采用实时荧光定量PCR技术（qPCR），通常基于TaqMan探针法。

靶标基因： 针对弓形虫基因组中的高度保守且特异的DNA序列设计引物和探针。常用的靶基因包括：

B1基因： 高度保守，拷贝数较多（约35-36拷贝/基因组），具有较高的灵敏度。

529bp非编码重复序列： 高度重复序列，灵敏度极高，常用于检测极低浓度的虫体DNA。

P30基因（SAG1）： 编码主要表面抗原，具有较好的特异性，有时用于区分不同毒力株。

反应机制： 反应体系中包含Taq DNA聚合酶、引物、探针和dNTPs。若样本中存在弓形虫DNA，扩增过程中FAM荧光标记的特异性探针会被水解，释放荧光信号。仪器通过监测荧光信号的扩增情况（Ct值）来判断样本中是否含有弓形虫DNA。

内标质控： 优质试剂盒通常包含内参（IC），标记HEX/VIC荧光，用于监控样本提取和PCR扩增是否成功，防止假阴性。

2. 产品特点

高特异性： 引物和探针经过优化，能特异性识别弓形虫DNA，通常不会与人基因组DNA或其他寄生虫（如疟原虫）发生交叉反应。

高灵敏度： 由于靶基因（如529bp序列）的高拷贝数，该方法极其灵敏，最低检测限可低至 10² copies/mL 甚至更低，能够检测到极低浓度的虫体，显著高于传统显微镜检查法。

快速高效： 整个检测过程（包括DNA提取和PCR扩增）通常在 2-3小时 冴完成，远快于耗时较长的动物接种法。

临床价值： 能够提供活动性感染的直接证据，尤其适用于免疫功能低下者（如艾滋病患者）、孕妇及先天性感染的快速诊断。

3. 主要用途

临床辅助诊断： 用于检测疑似感染者的羊水、脑脊液、外周血（全血/血清/血浆）、眼房水或组织样本。

产前诊断（优生优育）： 对于血清学检测提示近期感染的孕妇，通过羊水穿刺进行PCR检测是确诊胎儿是否发生宫内感染的首选方法（通常在孕18周后且距初次感染至少5周进行）。

中枢神经系统感染诊断： 对于艾滋病患者或免疫抑制者出现脑部占位性病变时，脑脊液PCR检测有助于确诊弓形虫脑炎。

4. 储存与使用注意事项

储存条件： 试剂盒组分（特别是酶混合液）通常需要 -20℃ 避光保存，避免反复冻融，有效期通常为12个月。

样本类型： 不同样本的检出率不同。羊水和脑脊液的特异性较高；血液样本在急性期可能阳性，但在慢性期或免疫功能正常者中可能呈阴性。

操作规范： 需在具备PCR检测资质的实验室进行，严格分区操作（试剂准备区、样本制备区、扩增区），防止气溶胶污染。

结果判读（参考值）：

阳性： FAM通道扩增曲线呈典型“S”型，且Ct值 ≤ 35-40（不同厂家设定阈值不同）。

阴性： 无扩增曲线，或Ct值大于阈值。

注意： 阴性结果不能完全排除感染，可能与样本中虫体数量少、DNA提取失败或处于潜伏期（包囊型）有关。在免疫缺陷患者中，PCR检测是确诊的金标准之一。

公司正在出售的产品：

1. 样本制备

使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。

关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。

2. 反应体系配置

常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需额外加入探针或染料。

3. 扩增程序

常规PCR：

预变性→循环扩增→延伸

qPCR：

预变性→循环扩增（荧光采集）

4. 结果判读

常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。

qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。