产品介绍:
弓形虫(Toxoplasma gondii)核酸检测试剂盒主要用于体外定性检测人体样本中的弓形虫DNA,是辅助诊断弓形虫病、评估先天性感染风险的重要分子生物学工具。
1. 检测原理
目前的试剂盒主要基于实时荧光定量PCR技术(Real-time PCR)。
靶标基因: 针对弓形虫基因组中的高度保守序列设计特异性引物和探针。
B1基因: 最常用的靶标,该基因在弓形虫基因组中呈多拷贝存在(约35个拷贝),具有较高的检测灵敏度。
产品名称 | 弓形虫核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3263 |
529bp重复序列(AF146527): 这是一个高度重复的基因片段,灵敏度通常高于B1基因,是目前主流试剂盒的首选靶标。
18S rRNA基因: 也有部分试剂盒针对核糖体RNA基因设计。
技术原理: 采用 TaqMan探针法。在PCR扩增过程中,若样本中存在弓形虫DNA,探针会被酶切并释放荧光信号(通常为FAM通道),仪器通过监测Ct值(循环阈值)来判断结果。
内标对照: 为了监控样本提取和扩增过程,试剂盒通常会设置内标(Internal Control),标记不同的荧光通道(如HEX/VIC),用于检测人类看家基因(如RNase P),防止假阴性。
2. 产品特点
高特异性: 专门针对弓形虫设计,能够特异性识别弓形虫,通常不会与人基因组DNA或其他病原体(如疟原虫、隐孢子虫)发生交叉反应。
高灵敏度: 由于靶标通常选择多拷贝基因(如529bp重复序列),最低检测限通常可达 10² - 10³ copies/mL,能够检测到极低浓度的感染。
快速高效: 检测时间通常在 2-3 小时 左右,远快于传统的染色试验(DT)或小鼠接种分离法。
早期诊断: 核酸检测可在感染早期(急性期)直接检测到病原体,不受宿主免疫应答状态(抗体产生时间)的影响。
3. 主要用途
产前筛查与诊断: 用于检测孕妇羊水或绒毛膜样本,辅助诊断胎儿是否发生先天性弓形虫感染,评估胎儿畸形风险。
免疫缺陷患者监测: 用于检测艾滋病(AIDS)患者或器官移植受者的血液、脑脊液样本,辅助诊断弓形虫脑炎等严重并发症。
眼部疾病诊断: 用于检测眼内液(如房水、玻璃体液)样本,辅助诊断弓形虫性视网膜脉络膜炎。
新生儿筛查: 用于检测新生儿足跟血或体液,早期发现先天性感染。
4. 储存与使用注意事项
储存条件: 试剂盒通常需要 -20℃ 避光保存(部分酶制剂对温度敏感),避免反复冻融,有效期通常为12个月。
样本类型: 主要用于检测羊水、全血(抗凝血)、脑脊液、眼内液或组织研磨液。
操作规范: 需在具备PCR检测资质的实验室进行,严格分区操作(试剂准备区、样本制备区、扩增区),防止气溶胶污染。
结果判读:
阳性: FAM通道扩增曲线呈典型“S”型,且Ct值小于设定的阈值(通常在35-40之间)。
阴性: 无扩增曲线,或Ct值大于阈值。
无效: 阳性对照未扩增或内标(如有)未扩增,提示实验失败,需重做。
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检测性能优势:
高灵敏度
最低检出限达100-500拷贝/mL,显著高于传统培养法(需10-10 CFU/mL)。
强特异性
采用荧光探针法,避免与其他链球菌交叉反应,特异性≥99%。
二、临床应用价值
快速出结果
全程检测时间1-2小时(含核酸提取),较培养法(24-48小时)效率提升显著。
自动化兼容
支持批量样本处理,可搭配全自动核酸提取仪,适合大规模筛查。
三、操作便捷性
样本类型灵活
适用于阴道拭子、直肠拭子及尿液样本,采集后可直接检测。
操作简化
部分试剂盒采用一体化设计(如卡尤迪产品),减少人工操作步骤
关键字: 弓形虫;检测试剂盒;
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