产品介绍：
猪劳森氏胞内菌(LI)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 是一种专门用于体外定性检测猪劳森氏胞内菌（Lawsonia intracellularis, LI）核酸的分子诊断工具。
该试剂盒基于实时荧光定量PCR技术（qPCR），主要用于猪增生性肠病（Porcine Proliferative Enteropathy, PPE），俗称“猪回肠炎”的早期辅助诊断、流行病学调查及药物筛选。鉴于猪劳森氏胞内菌为专性细胞内寄生菌，体外培养困难，核酸检测因其高灵敏度和特异性，已成为确诊该病的首选实验室方法。
产品名称 | 猪劳森氏胞内菌(LI)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3668 |
以下是关于该试剂盒的详细介绍：
检测原理与技术
该试剂盒主要采用TaqMan荧光探针法，通过特异性引物和探针靶向猪劳森氏胞内菌的保守基因序列进行扩增和检测。
靶标基因： 针对猪劳森氏胞内菌基因组中高度保守的区域设计引物和探针（如16S rRNA基因或特异性膜蛋白基因）。
技术原理： 由于猪劳森氏胞内菌是细菌（DNA），试剂盒采用荧光PCR法（不需要逆转录步骤）。
扩增： 在Taq DNA聚合酶的作用下，对样本中的靶基因进行指数级扩增。
检测： 随着扩增产物的累积，特异性探针（通常标记为FAM荧光素）被酶切释放荧光信号，仪器实时监测信号变化。
内标质控： 试剂盒通常包含内源性内标（IC），用于监控样本采集、核酸提取及PCR扩增过程是否正常，防止因操作失误或抑制物存在导致的假阴性。
�� 核心性能指标
指标 参数 说明
检测样本 粪便、肠黏膜刮取物、肠道组织（回肠/盲肠） 适用于临床及环境监测
检测下限 1×10³ - 1×10⁴ copies/mL 灵敏度高，可检出潜伏期或亚临床感染
特异性 强 不与猪肠道内其他常见细菌（如大肠杆菌、沙门氏菌）发生交叉反应
检测时间 约1.5 - 2小时 含DNA提取及PCR扩增步骤
保存条件 -20℃ ±5℃（部分产品2-8℃） 避光保存，避免反复冻融
�� 典型操作流程
样本采集：
活猪： 采集新鲜粪便或直肠拭子。
死猪/剖检： 刮取回肠或盲肠黏膜组织液，或采集肠道内容物。
DNA提取： 使用试剂盒配套的细菌DNA提取试剂（磁珠法或离心柱法）提取样本中的总DNA。
反应体系配制： 将提取的DNA模板、PCR反应液、酶混合物等按比例加入PCR反应管中。
上机扩增： 放入荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Roche LightCycler等）中运行程序。
结果判读：
阳性： FAM通道出现典型的S型扩增曲线，且Ct值 ≤ 35-40，表明样本中存在猪劳森氏胞内菌核酸。
阴性： FAM通道无扩增曲线，或Ct值 > 40。
�� 临床与应用意义
早期诊断： 在猪群出现轻微腹泻或生长迟缓时即可确诊，比血清学方法更早发现感染，有助于及时用药（如泰妙菌素、沃尼妙林）。
鉴别诊断： 用于区分猪增生性肠病与其他引起腹泻的疾病（如猪痢疾、大肠杆菌病、球虫病等）。
流行病学监测： 用于评估猪场感染压力，监测疫苗免疫效果及药物净化效果。
种猪引进： 用于检测引进种猪是否携带病原，防止引入传染源。
⚠️ 注意事项
用途限制： 市场上大多数此类产品明确标注“仅用于科研”或“实验室专用”，不作为临床诊断的唯一依据，购买时需注意产品说明。
防污染： PCR实验室必须严格分区（试剂准备区、样本制备区、扩增区），操作人员需穿戴一次性手套和口罩，防止气溶胶污染导致的假阳性。
结果解读： 阳性结果表明存在猪劳森氏胞内菌感染，但需结合猪群的临床症状（如褐色糊状粪便、消瘦）、病理变化（回肠黏膜增厚）及流行病学史进行综合判断。由于该菌常存在于亚临床感染猪只中，检出核酸不一定代表发病，需结合载量（Ct值）综合评估。
PCR试剂盒的核心类型：
1. 常规PCR试剂盒
原理：通过引物扩增目标DNA片段，产物经琼脂糖电泳检测。
特点：操作简单、成本低，适用于定性检测（如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒）。
典型应用：动物病原体筛查。
2. 荧光定量PCR（qPCR）试剂盒
探针法（TaqMan）：
利用特异性探针结合目标序列，荧光信号实时监测扩增过程。
优势：高特异性（如牛白血病病毒试剂盒）、宽线性范围（10²–10⁷拷贝/μL）。
染料法（SYBR Green）：
染料嵌入双链DNA发光，成本较低，但需优化引物特异性。
3. 恒温扩增试剂盒
技术：LAMP、RPA等，无需热循环仪，适合现场检测。
公司正在出售的产品：
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关键字： 猪劳森氏胞内菌 ;LI ;检测试剂盒;荧光PCR法;
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