产品概述：
Recombinant Human BIT1（人源BIT1重组蛋白）是一种在大肠杆菌中表达的线粒体来源促凋亡蛋白，主要用于研究其通过脱粘附或应激信号释放来诱导细胞凋亡的分子机制，以及在肿瘤发生和发育调控中的作用。
产品名称; Recombinant Human BIT1
别名; Bcl 2 inhibitor of transcription 1, Bcl-2 inhibitor of transcription 1, BIT 1, BIT1, CGI 147, CGI147, mitochondrial, Peptidyl tRNA hydrolase 2 mitochondrial, Peptidyl-tRNA hydrolase 2, PTH 2, PTH2, PTH2_HUMAN, PTRH 2, PTRH2
宿主; E.Coli
表达区间; 64-179
分子量; 12.7 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
存储条件：
冻干状态: 存储于-20°C以下，可稳定保存长达12个月。
复溶后: 在2-8°C下可保存1个月，需保持无菌环境。
注意事项: 避免反复冻融，以防止蛋白降解或活性损失。
使用说明：
复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理：
基因克隆：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。
蛋白纯化：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。
操作要点：
电泳条件：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
转膜参数：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。
抗体选择：
一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。
二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。
显色方式：ECL化学发光法，预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。
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关键字： BIT1;12.7 kDa; 64-179;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
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