预期用途
本试剂盒基于PCR技术，专用于威灵仙（Radix clematidis）核酸的特异性检测，适用于科研领域。其特点包括：
即开即用：仅需提供DNA模板。
高特异性：优化引物仅扩增威灵仙靶基因，无交叉反应。
质控完备：含阳性质控品（明确扩增条带）和阴性质控品（排除污染）。
便捷电泳：预混上样染料，PCR产物可直接电泳分析。
产品名称 | 威灵仙探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Radix Clematidis Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4955 |
检验原理
通过设计威灵仙保守基因区域的特异性引物，对样本DNA进行PCR扩增，经琼脂糖凝胶电泳检测扩增片段，实现定性分析。
试剂组成
威灵仙扩增液（50μL×1管）
威灵仙反应液（950μL×1管）
阳性质控品（50μL×1管）
阴性质控品（50μL×1管）
说明书（1份）
储存与有效期
-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次），有效期12个月。
适用仪器
常规PCR仪、电泳系统（电泳槽、电泳仪、凝胶成像仪）
无核酸酶耗材（离心管、吸头等）及核酸提取设备。
样本要求
样本类型：食品、口腔拭子、粪便等，避免交叉污染。
保存条件：短期-20℃，长期-70℃（≤6个月），运输需2~8℃冰袋。
操作步骤
DNA提取：推荐使用柱式提取试剂盒，提取后模板保存于-15℃以下。
试剂配制：
反应体系：19μL反应液 + 1μL扩增液/样本（需额外配制阴阳性对照）。
分装后短暂离心，转移至样本区。
加样：每管加入5μL模板DNA（浓度建议50ng/μL以下）。
PCR扩增：
循环参数：95℃ 3min预变性；35循环（95℃ 10s, 58℃ 15s, 72℃ 20s）；72℃ 5min终延伸。
结果分析：
电泳检测：取10-20μL产物，阳性对照需出现目标条带，阴性对照无扩增。
无效实验判定：阴阳性质控结果异常需重复实验。
注意事项
分区操作（样本处理、试剂配制、扩增），避免污染。
使用一次性耗材，实验后台面需用10%次氯酸或75%乙醇消毒。
试剂盒组分不可跨批号混用，避免反复冻融。
局限性
假阳性风险：交叉污染或质控品泄漏。
假阴性可能：提取效率低、抑制剂存在或试剂保存不当。
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