降香探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 降香探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Lignum Dalbergiae Odoriferae Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5077 |
产品用途
专用于降香（Lignum dalbergiae odoriferae）的核酸定性及定量检测，仅限科研使用。
产品特点
即开即用：用户仅需提供样品DNA/RNA模板，预混试剂含优化引物、探针、酶及缓冲液。
高灵敏度与特异性：引物基于降香保守序列设计，避免与其他微生物核酸交叉反应。
双重质控：提供阳性对照（无传染性DNA片段）和阴性对照，有效区分假阴性。
兼容性广：支持探针法荧光定量PCR，适用于ABI、Roche等主流仪器。
灵活应用：可进行绝对定量（标准曲线法）或定性检测（Ct值阈值法）。
试剂盒组成
PCR MagicMix 3.0：含Taq酶、dNTPs、Mg²⁺及缓冲液（红盖，1 mL）
降香特异性引物探针混合液（白盖，100 μL）
阳性对照（1×10⁸拷贝/μL，黄盖，50 μL）
超纯水（亮黄盖，1 mL）
核酸释放剂（试用装）（绿盖，1 mL）
使用手册（含标准曲线制备指南）
操作流程
1. 标准曲线制备（定量检测）
梯度稀释阳性对照（10⁶-10¹拷贝/μL），每稀释度独立操作以避免污染。
以log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，R²需≥0.99。
2. 样品处理
提取样品RNA/DNA（兼容柱式提取法或核酸释放剂）。
设置N+2个检测孔（含阴性对照和制备对照）。
3. PCR反应体系（20μL）
| 成分 | 体积（μL） |
| 2× PCR Mix | 10 |
| 引物探针混合液 | 2 |
| 模板DNA/RNA | 2 |
| 超纯水 | 补至20 |
4. 扩增程序
预变性：95℃ 3 min
循环：95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（40 cycles，荧光采集）
结果判读
定量分析：通过标准曲线计算样品拷贝数。
定性分析：
阳性：Ct≤36，扩增曲线呈S型。
阴性：Ct≥40或无Ct值。
可疑：36<Ct<40，需复测确认。
运输与保存
运输条件：低温干冰运输。
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
注意事项
操作分区进行（试剂配制、样品处理、扩增区），避免气溶胶污染。
阳性对照需最后加入，防止污染其他反应管。
实验废弃物需经消毒处理后再丢弃。
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