蒺藜探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 蒺藜探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Fructus Tribuli Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5080 |
技术原理
本试剂盒基于实时荧光定量PCR(qPCR)技术,采用特异性探针法检测。探针5'端标记荧光报告基团,3'端标记淬灭基团,通过Taq酶5'→3'外切酶活性切割探针释放荧光信号,实现靶序列的定量与定性分析。

产品特点
高特异性:针对蒺藜保守序列设计引物及探针,无交叉反应。
高灵敏度:检测下限达10~100拷贝/μL。
操作简便:预混缓冲液与酶体系,减少操作步骤。
内控完善:含阳性对照(1×10^8拷贝/μL),便于结果验证。
防污染设计:试剂经磷酸化处理,避免非特异性扩增。
试剂盒组成
| 成分 | 规格 |
| 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500 μL |
| 探针法qRT-PCR酶混合液 | 100 μL |
| 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL |
| 蒺藜引物混合液 | 100 μL |
| 蒺藜qPCR探针 | 50 μL |
| 阳性对照(1×10^8拷贝/μL) | 50 μL |
实验步骤
标准曲线制备:将阳性对照10倍梯度稀释(10^2~10^7拷贝/μL)。
RNA提取:自备样本RNA,建议设置阴性/阳性对照。
反应体系配制(20 μL/管):
缓冲液10 μL + 酶混合液2 μL + 探针1 μL + 引物混合液2 μL + 模板RNA 5 μL。
PCR程序:
逆转录:50℃ 30 min → 预变性:94℃ 10 min → 40循环(94℃ 15 sec,60℃ 1 min,采集FAM通道信号)。
数据分析
定量分析:以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴,计算样本浓度。
定性判定:
Ct≤35为阳性;Ct≥40为阴性;35<Ct<40需复测。
注意事项
实验分区操作,避免气溶胶污染。
阳性对照需最后加入,单独存放。
本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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