谷芽探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 谷芽探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Fructus Setariae Germinatus Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5112 |
产品概述
本试剂盒采用探针法实时荧光定量PCR技术，专用于谷芽（Fructus setariae germinatus）的分子鉴定，通过扩增其特异性DNA序列（如ITS或matK基因），实现高特异性、高灵敏度的检测，适用于中药材真伪鉴别及科研用途。
核心特点
高特异性：引物及探针针对谷芽保守序列设计，与其他植物无交叉反应。
即开即用：预混PCR反应液含酶、缓冲液及探针，用户仅需提供DNA模板。
灵敏度优异：最低检测限达8拷贝/μL，可检测微量降解DNA。
防污染设计：一管式闭管操作，减少气溶胶污染风险。
内控完善：提供阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）及阴性对照，确保结果可靠性。
规格与成分
| 成分 | 规格/包装 | 保存条件 |
| 2×Probe qPCR MagicMix | 1 mL（红盖） | -20℃避光 |
| 谷芽特异性引物混合液 | 100 μL（白盖） | -20℃避光 |
| 谷芽qPCR探针 | 50 μL（黄盖） | -20℃避光 |
| 阳性对照（标准品） | 50 μL（1×10⁸拷贝/μL） | 单独存放，-20℃ |
| 核酸释放剂（试用装） | 1 mL（绿盖，20次） | 常温 |
| 使用手册 | 1份 | - |
注：试剂盒保存期限为1年（-20℃），阳性对照避免反复冻融（≤3次）。
操作流程
1. 样品DNA制备
样本处理：取20 mg谷芽粉末，加入1 mL核酸释放剂，95℃裂解10分钟，离心取上清作为模板。
对照设置：
阳性对照：将标准品梯度稀释至1×10³拷贝/μL。
阴性对照：以超纯水替代模板。
2. PCR反应体系（20 μL/反应）
| 组分 | 添加量 |
| 2×Probe qPCR MagicMix | 10 μL |
| 引物混合液 | 1 μL |
| qPCR探针 | 1 μL |
| DNA模板/对照 | 8 μL |
3. 扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 变性-退火-延伸 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| | 60℃ | 30 sec | |
4. 结果分析
阳性判定：Ct值≤35且扩增曲线呈S型。
溶解曲线：单峰表明特异性扩增。
注意事项
防污染措施：分区域操作（试剂准备区、样本区、扩增区），使用带滤芯吸头。
抑制剂处理：若扩增失败，建议将模板稀释10倍后重新检测。
适用范围：仅限科研，不适用于临床诊断。
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