稻芽探针法PCR鉴定试剂盒

产品概述

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术，专用于稻芽（Fructus oryzae germinatus）的快速、高灵敏度鉴定。适用于科研领域，可进行定性和定量分析，检测线性范围达5个数量级，50次反应体系（20μL/次）。

产品特点

高特异性：引物与探针针对稻芽DNA高度保守区设计，无交叉反应。

灵敏度高：可检测低至10拷贝/μL的靶序列。

即开即用：预混优化试剂，仅需提供DNA模板。

质量控制：含阳性对照（无传染性DNA片段），避免假阴性干扰。

兼容性：支持常规RNA提取方法或配套核酸释放剂。

组分清单

PCR反应液（含Taq酶、dNTPs、缓冲液等）

荧光探针混合液

阳性对照（1×10^8拷贝/μL）

模板稀释液

核酸释放剂（试用装）（可选）

使用说明书

操作步骤

1. 标准曲线制备（以10^1–10^6拷贝/μL为例）

标记6管，依次加入45μL稀释液，梯度稀释阳性对照（5μL/管），涡旋混匀后冰上保存。

2. 样本处理

提取待测样本DNA，建议设置阴性对照（水）和制备阳性对照（PC）。

3. PCR反应体系（20μL/管）

| 成分 | 体积（μL） |

| 预混PCR反应液 | 10 |

| 探针混合液 | 2 |

| 模板DNA | 5 |

| 超纯水 | 补至20 |

4. 扩增程序

95℃预变性5分钟；95℃ 15秒→60℃ 1分钟（40循环），荧光信号采集于60℃阶段。

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。

定性检测：

阴性：Ct≥40或无扩增曲线；

阳性：Ct≤36且曲线典型；

可疑值（36<Ct<40）需复测。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需独立区域，避免污染。

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

安全规范：使用一次性耗材，实验后消毒台面。

适用范围：仅限科研，不适用于临床诊断。

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