枸杞子探针法PCR鉴定试剂盒

枸杞子探针法PCR鉴定试剂盒

商品属性

检测原理

基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，采用探针法原理：

探针设计：5'端标记荧光报告基团（如FAM），3'端标记淬灭基团，探针与靶序列结合后，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针，释放荧光信号。

定量分析：通过监测荧光信号增长（Ct值）实现模板的定性与定量检测，线性范围达5个数量级（10¹~10⁶拷贝/μL）。

产品组成

| 成分 | 规格/含量 |

| qRT-PCR缓冲液 | 500μL |

| qRT-PCR酶混合液 | 100μL |

| 荧光PCR模板稀释液 | 1mL |

| 枸杞子特异性引物混合液 | 100μL |

| 枸杞子探针 | 50μL |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50μL |

| 说明书 | 1份 |

实验步骤

1. 标准曲线制备（6个梯度稀释）：

阳性对照依次稀释（10倍梯度），得到10⁷~10²拷贝/μL的标准品。

2. 样本RNA提取：

推荐使用柱式病毒RNA提取试剂盒，设置阴性对照（NC）和阳性对照（PC）。

3. qRT-PCR反应体系（20μL）：

| 成分 | 体积（μL） |

| qRT-PCR缓冲液 | 10 |

| 酶混合液 | 2 |

| 探针 | 1 |

| 引物混合液 | 2 |

| RNA模板 | 5 |

4. 反应程序：

逆转录：50℃ 30分钟

预变性：94℃ 10分钟

PCR循环（40次）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM通道信号）

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴，Ct值为纵轴，计算样本浓度。

定性检测：

阳性：Ct ≤ 35，典型扩增曲线；

阴性：Ct ≥ 40；

可疑（35<Ct<40）：需复测。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免交叉污染。

质量控制：每批次实验需包含阴/阳性对照。

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

探针保护：避光保存，避免反复冻融。

公司正在出售的产品