藕节探针法PCR鉴定试剂盒

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专用于藕节（Nodus nelumbinis rhizomatis）的快速、高灵敏度鉴定，适用于科研用途。试剂盒包含优化的引物、探针及预混反应体系，支持定性和定量检测，线性范围达5个数量级，特异性强，可避免与其他微生物DNA的交叉反应。

产品组成

| 成分编号 | 成分名称 | 规格 |

| 试剂一 | 探针法qPCR缓冲液 | 500 μL |

| 试剂二 | 探针法qPCR酶混合液 | 50 μL |

| 试剂三 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL |

| 试剂四 | PCR引物-探针干粉 | 50次反应 |

| 试剂五 | PCR阳性对照（10^7拷贝/μL） | 50 μL |

操作流程

1. 标准曲线制备（定量检测需6个梯度稀释）

使用阳性对照（10^7拷贝/μL）按10倍梯度稀释至10^1~10^6拷贝/μL，独立操作避免污染。

2. 样品DNA提取

建议设置阴性对照（NC）和阳性对照（PC），使用兼容的DNA提取试剂盒纯化模板。

3. qPCR反应体系（20 μL/管）

| 成分 | 样品管 | 阴性对照管 | 标准曲线管 |

| qPCR缓冲液 | 10 μL | 10 μL | 10 μL |

| 酶混合液 | 2 μL | 2 μL | 2 μL |

| 探针引物混合液 | 3 μL | 3 μL | 3 μL |

| DNA模板 | 5 μL | — | — |

| 标准品稀释液 | — | — | 5 μL |

| 超纯水 | — | 5 μL | — |

4. 反应程序

逆转录：50℃ 30 min（若含RNA）；

预变性：94℃ 10 min；

40循环：94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号）。

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴计算样品浓度。

定性检测：Ct≤39为阳性，≥40为阴性；临界值（39~40）需复测。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行，避免交叉污染。

质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照。

保存条件：试剂-20℃保存，避免反复冻融；阳性对照单独存放。

安全规范：实验后使用10%次氯酸或75%酒精清洁台面，废弃物按生物危害处理。

局限性

检测结果受样本质量、提取效率及操作规范影响；

基因突变可能导致假阴性；

仅限科研使用，不可用于临床诊断。

公司正在出售的产品