操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
产品概述:

Recombinant Human NKB(重组人神经激肽B)是一种在大肠杆菌中表达的高纯度重组蛋白,作为速激肽家族的关键神经肽,它通过结合NK3受体(NK3R)在中枢神经系统中发挥神经调节作用,并在生殖内分泌(如GnRH脉冲分泌调控)及痛觉传导中具有重要研究价值12。
产品名 | Recombinant Human NKB | 分子量 | 11.4 kDa |
表达区间 | 17-121 | 货号 | XG-DB2779 |
别名
Gamma tachykinin 3, Neurokinin B, Neurokinin B like protein, Neurokinin B protein, Neurokinin beta, Neurokinin-B, NeurokininB, Neuromedin K, Neuromedin-K, NeuromedinK, NKB, NKNB, Preprotachykinin B, PreprotachykininB, PRO 1155, PRO1155, TAC 3, TAC3, Tachykinin 3, Tachykinin3, TKNK_HUMAN, ZNEUROK 1, ZNEUROK1
宿主; E.Coli
表达区间; 17-121
分子量; 11.4 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

谷氨酸脱羧酶65+谷氨酸脱羧酶67抗体 | R3H卷曲螺旋结构域蛋白1抗体 |
轴突生长诱向因子G2/神经突起生长导向因子G2抗体 | 组织长链脂酰氧化酶(acyl-CoA oxidase) |
维甲酸诱导蛋白3抗体 | 细胞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量检测试剂盒 |
F-box蛋白45抗体 | 石蜡切片组织APC蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
组织半胱-7(CASPASE-7)活性荧光定量检测试剂盒 | 细胞PI-3 KINASE P110BETA蛋白表达荧光定量检测试剂盒 |
定量PCR扩增检测试剂盒 | 可溶性包涵体蛋白复性(化学稀释II)试剂盒 |
细胞CDK3/CYCLIN E激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 锚蛋白重复及SAM结构域蛋白6抗体 |
通用型比色法定量检测试剂盒 | 蝶呤甲醇胺脱水酶2抗体 |
组织葡萄糖6-磷酸酶(glucose 6-phosphatase)活性比色法定量检测试剂盒 | 液泡膜质子转运ATP酶2型抗体 |
3’末端RNA探针同位素([α32P]dATP)聚合酶标记试剂盒 | Bcl2 beta蛋白抗体 |
Cy3标记的网格蛋白重链抗体 | 跨膜蛋白161A抗体 |
双参数细胞周期G2期流式细胞分析试剂盒 | Recombinant Human NKBγ谷氨酰转移酶抗体 |
基底膜相关软骨素蛋白多糖抗体 | HEATR4蛋白抗体 |
重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: NKB;11.4 kDa; 17-121;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。