产品介绍:

粪肠球菌(EF)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种用于体外定性检测样本中粪肠球菌(Enterococcus faecalis)特异性核酸的分子诊断工具。该试剂盒基于实时荧光定量PCR(qPCR)技术,通过扩增和检测病原体的特异性基因,来判断样本是否含有该细菌。
产品名称 | 粪肠球菌(EF)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3841 |
检测原理

该试剂盒通常采用TaqMan探针法进行检测,其流程如下:
模板准备: 从待测样本(如粪便、食品、环境拭子或临床体液样本)中提取细菌DNA。
荧光PCR扩增: 这是核心检测环节。
反应体系中包含针对粪肠球菌特异性保守基因(如16S rRNA基因或其他种属特异性序列)设计的特异性引物和荧光标记的探针。
在PCR扩增过程中,如果样本中含有粪肠球菌的DNA,探针会与目标基因片段特异性结合,并在DNA聚合酶的作用下被水解,从而释放出荧光信号。
荧光定量PCR仪会实时监测反应管中的荧光信号。通常使用FAM荧光通道来检测特异性信号。
结果判读: 根据Ct值(循环阈值)和扩增曲线的形态进行结果判定。通常,Ct值低于设定的阈值(如Ct≤35-40)且呈现典型的“S”型扩增曲线判为阳性,表明样本中检出粪肠球菌核酸。
主要用途

该试剂盒主要用于以下几个方面:
临床疾病诊断: 辅助诊断由粪肠球菌引起的感染,如尿路感染(最常见)、菌血症、心内膜炎及术后创伤感染等。粪肠球菌是医院内感染的重要病原菌之一。
食品安全检测: 用于食品(如乳制品、肉制品)及生产环境中的粪肠球菌污染检测,作为评价食品卫生质量的指标之一。
环境与水质监测: 检测水体或环境样本中的粪肠球菌,评估是否存在粪便污染。
科研应用: 广泛应用于微生物学、流行病学及抗生素耐药性研究等相关领域的科研实验。
方法优势

相较于传统的细菌培养法或生化鉴定,荧光PCR法具有以下显著优点:
高特异性: 通过针对粪肠球菌特异性基因设计的引物和探针,能够精准识别目标菌,有效区分近缘菌种(如屎肠球菌),避免假阳性。
高灵敏度: 能够检测出样本中极低含量的病原菌DNA(部分产品最低检测限可达10³ CFU/mL),有助于在细菌含量较低时做出准确判断。
快速高效: 整个检测过程通常在数小时内完成,远快于传统培养法(通常需要24-48小时),适合对大量样本进行快速筛查。
操作安全: 采用闭管检测模式,扩增后无需开盖处理,大大降低了扩增产物污染导致假阳性结果的风险。
核心优势与技术要点:

高特异性
引物设计基于目标基因保守区域,可区分高度同源序列(如病毒变异株)。
高灵敏度
检测限低至10拷贝/反应,适用于微量样本。
高效扩增
热启动酶(如HotStarTaq)减少非特异性扩增,30分钟内完成40个循环。
防污染设计
UNG酶系统降解残留产物,避免交叉污染。
稳定性提升
冻干预混技术实现常温运输,操作便捷。
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注意事项:

防污染操作
需在试剂准备区、样本处理区、扩增区独立操作,使用带滤芯吸头及专用实验服。
阳性对照管理
浓度高达1×10⁸拷贝/μL,需单独存放并避免污染其他试剂。
局限性
仅限科研使用,不可用于临床诊断;
环境样本中可能存在PCR抑制剂,需设置内参对照。
关键字: 粪肠球菌 ;EF; 荧光PCR法;核酸检测试剂盒;
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