山羊附红细胞体（山羊嗜血支原体）探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

山羊附红细胞体（山羊嗜血支原体）探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用TaqMan探针法荧光定量PCR技术，专用于检测山羊附红细胞体（现分类为山羊嗜血支原体，Mycoplasma ovis）的核酸。通过特异性引物和荧光探针靶向病原体保守基因序列（如16S rRNA或表面抗原基因），实现对样本中目标核酸的高灵敏度、高特异性定性和定量分析。

产品特点

高特异性：引物及探针经严格设计，与常见支原体（如猪嗜血支原体）无交叉反应，仅与近缘种牛嗜血支原体（M. haemovis）存在微弱交叉。

高灵敏度：检测限低至100拷贝/反应（部分版本可达10²拷贝/μL）。

操作便捷：预混反应液（如2×qPCR MagicMix）实现“即开即用”，减少配液步骤。

防污染设计：一管式闭管操作，避免扩增产物污染。

兼容性广：适配ABI 7500、LightCycler等主流荧光定量PCR仪（需支持FAM通道）。

试剂盒组成（50次反应）

| 成分 | 规格/功能 |

| 2×qPCR预混液 | 500 μL（含DNA聚合酶、dNTPs等） |

| 特异性引物混合物 | 100 μL（扩增目标基因） |

| TaqMan探针（FAM标记）| 50 μL（靶向结合序列） |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（定量标准品） |

| 阴性对照（超纯水） | 1 mL（污染监控） |

| 核酸释放剂（可选） | 20次用量（快速裂解样本） |

操作流程

样本制备

样本类型：EDTA抗凝全血、血清或组织样本。

提取方法：推荐柱式DNA提取试剂盒，或使用核酸释放剂（100℃裂解10分钟）。

反应体系配制（20 μL体系）

2×qPCR预混液：10 μL  

引物混合液：2 μL  

探针：2 μL  

模板DNA：2 μL  

超纯水补至20 μL  

注：冰上操作，避免反复冻融。

PCR扩增程序

预变性：95℃ 5分钟。

循环参数：95℃ 15秒 → 60℃ 45秒，共40循环（于60℃延伸阶段采集FAM信号）。

结果判读

阳性：Ct≤35且扩增曲线呈指数增长。

阴性：Ct≥40或无扩增曲线。

灰区：35<Ct<40需复检。

注意事项

储存与运输：-20℃避光保存，有效期12个月，避免反复冻融。

防污染措施：

分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区）。

使用带滤芯枪头，实验后紫外消毒工作台。

适用范围：仅限科研及兽医诊断用途，不可用于临床诊断。

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