猪附红细胞体（猪嗜血支原体）探针法荧光定量PCR试剂盒

猪附红细胞体（猪嗜血支原体）探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于TaqMan探针荧光定量PCR技术，专为检测猪附红细胞体（猪嗜血支原体，Mycoplasma suis）核酸设计，适用于猪血液、组织样本中的病原体精准定量与定性分析。其核心优势包括高特异性（针对猪嗜血支原体保守基因序列）、高灵敏度（检测限低至1000拷贝/反应）及闭管防污染设计，可广泛应用于养殖业疾病监测、临床诊断及科研领域。

试剂盒组分

| 组分 | 规格 | 功能说明 |

| 2×qPCR预混液 | 1 mL | 含DNA聚合酶、dNTPs及优化缓冲体系 |

| 猪嗜血支原体引物混合液 | 100 μL | 特异性扩增目标基因（如16S rRNA） |

| TaqMan探针（FAM标记） | 50 μL | 实时荧光信号检测 |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL | 标准曲线绘制及质控 |

| 阴性对照（超纯水） | 1 mL | 排除污染及假阳性 |

| 核酸释放剂（可选） | 1 mL | 简化DNA提取流程 |

操作流程

样本制备

使用商品化DNA提取试剂盒或配套核酸释放剂处理样本（如200 μL抗凝血）。

阳性对照梯度稀释（10²–10⁷拷贝/μL）用于标准曲线。

PCR体系配制（20 μL）

- 2×qPCR预混液: 10 μL  

- 引物混合液: 2 μL  

- 探针: 1 μL  

- 模板DNA: 2 μL  

- 无菌水补足至20 μL  

扩增程序

预变性：95℃ 5分钟

循环扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 45秒（采集FAM荧光），共40个循环。

适用仪器

ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler等主流荧光定量PCR仪。

结果判读

阳性：Ct值 ≤ 35，扩增曲线呈S型。

阴性：Ct值 ≥ 40或无扩增。

灰区样本：Ct值35–40需复检，复检阳性则判定感染。

定量分析：通过标准曲线计算样本中病原体拷贝数。

注意事项

操作需分区（试剂配制、样本添加、扩增分析）以避免污染。

阳性对照需单独存放，防止交叉污染。

本产品仅限科研使用，临床诊断需结合其他检测方法验证。

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