犬附红细胞体（犬嗜血支原体）探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 犬附红细胞体（犬嗜血支原体）探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Canine Eperythrozoon (Haemobartonella canis) Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5249 |
产品概述
本试剂盒基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术，针对犬附红细胞体（Eperythrozoon perekropovi）的保守基因区域（如16S rRNA）设计特异性引物和探针，实现高灵敏度、高特异性的核酸定性与定量检测。适用于科研领域对犬类血液样本中附红细胞体的感染监测及病原体载量分析。
技术特点
高特异性：引物探针针对犬附红细胞体高度保守区设计，无交叉反应。
高灵敏度：最低检测限为100–500拷贝/mL，可检出单个病原体核酸。
操作便捷：预混反应体系，支持免提取检测（部分含核酸释放剂）。
定量精准：通过标准曲线计算病原体载量，线性范围达5个数量级。
试剂盒组成
| 组分 | 规格/包装 | 功能说明 |
| 2×Probe qPCR MasterMix | 500 μL（预混液）| 含酶、dNTPs及优化缓冲体系 |
| 引物-探针混合液 | 150 μL | 靶向扩增特异性基因片段 |
| 阳性对照（1×10⁷拷贝/μL） | 50 μL | 实验有效性验证 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 样本稀释及阴性对照配置 |
| 核酸释放剂（可选） | 20次用量 | 免提取裂解液 |
| 使用手册 | 1份 | 操作流程及数据分析方法 |
操作流程
样本处理
样本类型：全血、血清或组织。
核酸提取：推荐柱式提取法；免提取法需使用配套核酸释放剂。
反应体系配置
体积：20 μL（MasterMix 10 μL + 引物-探针2 μL + 模板DNA 5 μL + 补水至20 μL）。
对照设置：每批需包含阴性对照（无菌水）及阳性对照。
扩增程序
预变性：95℃ 10分钟；
循环扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（FAM通道采集信号），共40–45循环。
结果分析
阳性判定：Ct值≤35且扩增曲线呈S型；
阴性判定：无Ct值或Ct值>40；
定量分析：通过标准曲线计算样本病原体载量。
注意事项
生物安全：需在BSL-2实验室操作，仅限科研使用，不可用于临床诊断。
防污染措施：严格分区操作，使用带滤芯枪头及无酶耗材。
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（≤10次），有效期12个月。
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