柠檬酸杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 柠檬酸杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Citrobacter Genus Universal Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5280 |
产品概述
本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术，专用于柠檬酸杆菌属（Citrobacter spp.）的快速、高特异性检测。适用于科研领域中对RNA制品的反转录及后续PCR扩增，可实现对目标基因的定性分析（非临床用途）。
产品特点
高灵敏度与特异性：引物及探针针对柠檬酸杆菌属高度保守区设计，避免与其他微生物发生交叉反应。
即开即用：预混优化试剂，仅需提供样品RNA模板。
内置对照：含阳性对照（无传染性DNA片段），便于区分假阴性结果。
操作便捷：PCR mix含上样染料，扩增产物可直接电泳。
稳定性：-20℃保存，避免反复冻融，有效期12个月。
技术参数
规格：50次/盒（20μL反应体系）
检测限：可检测低至10²拷贝/μL的模板。
荧光参数：激发波长471 nm，发射波长530 nm（结合DNA后）。
适用范围：食品、血液、粪便及病灶样本的RNA检测（需配合RNA提取试剂盒）。
操作流程
1. 样本前处理
RNA提取：建议使用柱式病毒RNA提取试剂盒，避免RNase污染。
阳性对照稀释：按10倍梯度稀释（10²~10⁷拷贝/μL），独立操作以防污染。
2. 反应体系配制
| 成分 | 体积（μL） |
| qRT-PCR缓冲液 | 10 |
| 酶混合液 | 2 |
| 探针 | 1 |
| 引物混合液 | 2 |
| 模板RNA | 5 |
3. PCR扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 反转录 | 42℃ | 15 min | 1 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 扩增 | 95℃ 15 s → 60℃ 1 min | 40 |
| 荧光采集 | 60℃ | 30 s | |
结果判读
定性分析：
阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈典型S型。
阴性：Ct值≥40或无扩增。
可疑（35<Ct<40）：需重复检测。
标准曲线：以阳性对照Ct值绘制log浓度曲线，推算样本初始模板量（若需半定量）。
注意事项
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
操作需在无菌环境下进行，穿戴实验服、口罩及手套。
避免试剂反复冻融，分装保存以维持稳定性。
探针法需避光保存，防止荧光淬灭。
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