荞麦源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

荞麦源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

用于食品（如植物源蛋白饮料、糕点、代餐、糖果、酱料等）中荞麦源性成分的定性及定量检测，适用于科研领域。

检测原理

采用探针法荧光定量PCR技术，通过特异性引物和探针扩增荞麦源性成分的保守基因序列。探针5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团，PCR扩增时Taq酶的5'核酸外切酶活性切割探针，释放荧光信号，实时监测扩增曲线实现定量分析。

主要组分

探针法qRT-PCR缓冲液

探针法qRT-PCR酶混合液（含逆转录酶、Taq酶等）

荧光PCR专用模板稀释液

荞麦源性成分特异性引物及探针混合液

阳性对照（1×10^8拷贝/μL，无传染性DNA片段）

说明书

操作流程

1. 标准曲线制备

将阳性对照按10倍梯度稀释（10^2~10^7拷贝/μL），用于绘制标准曲线。

2. 样本RNA提取

使用兼容的RNA提取试剂盒制备待测样本RNA，建议设置阴/阳性对照。

3. PCR反应体系（20μL）

| 成分 | 体积（μL） |

| qRT-PCR缓冲液 | 10 |

| 酶混合液 | 2 |

| 探针 | 1 |

| 引物混合液 | 2 |

| 样本RNA/标准品/水 | 5 |

4. 扩增程序

逆转录：50℃ 30分钟

预变性：94℃ 10分钟

PCR循环（40次）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM通道荧光信号）

数据分析

定量检测：根据标准曲线计算样本拷贝数。

定性检测：Ct值≥40判为阴性，阳性对照需符合预期。

注意事项

分区操作：样本制备区与扩增区需物理隔离，避免污染。

防污染措施：使用带滤芯枪头，废弃物密封处理。

试剂保存：避光操作，未使用试剂避免反复冻融。

适用范围：仅限科研，不可用于临床诊断。

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