麝源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 麝源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Musk-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5328 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术(qPCR),专用于检测麝源性成分的核酸序列。通过特异性探针与靶序列结合,利用Taq酶的5’核酸外切酶活性切割探针,释放荧光信号,实现高灵敏度、高特异性的定量检测。适用于科研用途,不可用于临床诊断。

产品特点
即开即用:用户仅需提供样品RNA模板,操作简便。
高灵敏度与特异性:引物及探针针对麝源性成分高度保守区设计,避免与其他病毒RNA交叉反应。
内置阳性对照:含1×10⁸拷贝/μL的阳性对照(无传染性DNA片段),便于区分假阴性结果。
稳定可靠:50次20μL体系反应,批间差异小,重复性好。
规格与成分
| 成分编号 | 成分名称 | 规格 |
| A | 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500 μL(黄盖) |
| B | 探针法qRT-PCR酶混合液 | 100 μL(红盖) |
| C | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) |
| D | 麝源性成分qRT-PCR引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| E | 麝源性成分qRT-PCR探针 | 50 μL(棕色管) |
| F | 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) |
| G | 核酸稀释剂(试用装) | 20次(1 mL,绿盖) |
| H | 使用手册 | 1份 |
运输与保存
运输条件:低温运输(-20℃冰袋或干冰)。
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
使用方法
1. 标准曲线制备
以10²~10⁷拷贝/μL的6个梯度稀释为例:
标记离心管(7~2号),每管加45 μL模板稀释液。
7号管加入5 μL阳性对照(1×10⁸拷贝/μL),震荡混匀得10⁷拷贝/μL标准品,依次稀释至10²拷贝/μL。
2. 样品RNA制备
建议设置阳性对照(PC)和阴性对照(NC)。
使用兼容的RNA提取试剂纯化样本,避免污染。
3. qRT-PCR反应体系(20 μL)
| 成分 | 样品管(μL) | 阴性对照(μL) | 标准曲线管(μL) |
| qRT-PCR缓冲液(A) | 10 | 10 | 10 |
| 酶混合液(B) | 2 | 2 | 2 |
| 探针(E) | 1 | 1 | 1 |
| 引物混合液(D) | 2 | 2 | 2 |
| 样品RNA/标准品/水 | 5 | 5(水) | 5(标准品) |
4. 反应程序
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 逆转录 | 50℃ | 30 min |
| 预变性 | 94℃ | 10 min |
| 40次循环 | 94℃ | 15 sec |
| | 60℃ | 1 min(采集FAM通道信号) |
数据分析
定量分析:以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴,计算样本浓度。
定性分析:阴性对照Ct值≥40,阳性对照Ct值≤35为有效。
注意事项
操作需在独立区域进行,避免交叉污染。
样本建议保存于液氮、-80℃或Trizol中,避免反复冻融。
本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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