核桃源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 核桃源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Walnut-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5316 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术开发，专用于检测样品中的核桃（胡桃）源性成分，适用于科研领域（不可用于临床）。试剂盒包含优化的引物、探针及对照体系，具有高灵敏度和特异性，可定性或定量分析，检测下限为0.1ng/μL（核酸）或混合样品中0.01%的核桃成分。
规格及组分
| 成分 | 规格 | 功能 |
| qPCR缓冲液/酶混合液 | 500μL/100μL | 反应体系核心组分 |
| 荧光PCR模板稀释液 | 1mL | 标准品稀释及阴性对照 |
| 核桃源性引物-探针混合液 | 100μL（或干粉需复溶） | 特异性扩增靶序列 |
| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50μL | 标准曲线制备及质控 |
| 说明书 | 1份 | 操作指南 |
储存与运输
储存条件：-20℃避光保存，有效期12-24个月。
运输方式：低温运输，避免反复冻融。
实验流程
1. 样品制备
DNA提取：需自备样品DNA，推荐使用兼容的核酸提取试剂盒。
阳性对照稀释：按10倍梯度稀释（10²-10⁷拷贝/μL）制备标准曲线。
2. PCR反应体系（20μL）
| 组分 | 体积（μL） |
| qPCR缓冲液 | 10 |
| 酶混合液 | 2 |
| 引物-探针混合液 | 2-3 |
| 模板DNA | 5 |
3. 扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 逆转录（若需） | 50℃ | 30 min |
| 预变性 | 94℃ | 10 min |
| 扩增循环（40次） | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号） |
数据分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴计算样品浓度。
定性判定：
阳性：Ct值<35，S型扩增曲线。
阴性：Ct值≥38或无信号。
可疑：35≤Ct<38需复测。
注意事项
操作分区：样本制备、试剂配制、扩增需严格分区，避免污染。
阳性对照单独存放，防止交叉污染。
使用带滤芯枪头，每次更换避免交叉污染。
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