巴西果仁源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

巴西果仁源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术，专用于检测巴西果仁源性成分，适用于食品、生物样本中巴西果仁成分的定性与定量分析。检测结果仅供科研使用，不可用于临床诊断。

试剂组成

巴西果仁源性成分扩增液：25μL×1管

巴西果仁源性成分反应液：975μL×1管

阳性质控品（人工合成DNA片段）：50μL×1管

阴性质控品：50μL×1管

说明书：1份

注意：不同批号组分不可混用，试剂盒提供足够50次检测用量。

实验原理

针对巴西果仁源性成分基因高度保守区域设计特异性引物和探针，通过实时荧光PCR技术对核酸进行体外扩增检测。当反应体系中含有目标核酸模板时，PCR反应释放荧光信号，仪器实时监测荧光强度，实现定性定量分析。

样本要求

样本类型：

食品样品：需按微生物学检验标准预处理

血液样品：2mL EDTA抗凝静脉血

粪便样品：灭菌管收集

组织样品：肠道等部位无菌采集

样本保存：

短期：-20℃

长期：-70℃（不超过6个月）

运输：2-8℃冰袋，避免反复冻融

实验操作流程

样本DNA制备

设置N+2个提取（N=样品数+1阳性对照+1阴性对照）

推荐使用商品化DNA提取试剂盒

提取后DNA建议-15℃以下保存

阳性对照稀释（10E2-10E7拷贝/μL梯度制备）

标记6管（7-2号），各加45μL稀释液

7号管加5μL原液（10E8拷贝/μL），震荡得10E7拷贝/μL

依次10倍稀释至2号管（10E2拷贝/μL）

所有稀释步骤需在独立区域进行，使用滤芯枪头

反应体系配制（20μL/反应）

| 组分 | 体积 |

| 反应液 | 19.5μL |

| 扩增液 | 0.5μL |

| 模板DNA | 5μL |

注意：需额外配制阴性质控（水）和阳性质控（10E4-10E5拷贝/μL）

PCR扩增程序

预变性：95℃ 5分钟

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（45个循环）

信号采集：退火/延伸阶段

结果分析

阴性对照：无扩增曲线

阳性对照：Ct值≤35

样品判定：Ct值<40为阳性，≥40为阴性

注意事项

实验分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区）

使用无核酸酶耗材（离心管、吸头等）

避免气溶胶污染，操作时更换手套

阳性对照最后加入，防止污染

本产品仅限科研使用

性能参数

灵敏度：100拷贝/μL

特异性：不与常见食源性成分交叉反应

重复性：CV<5%

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