含麸质谷物源性探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 含麸质谷物源性探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Gluten-containing Grain-derived Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5323 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专用于检测食品或其他样本中的麸质源性成分。通过特异性引物和探针设计，可实现对麸质基因组DNA的高灵敏度、高特异性检测，适用于科研领域的定性或定量分析。
规格与成分
试剂一：探针法qRT-PCR缓冲液（500μL）
试剂二：探针法qRT-PCR酶混合液（100μL）
试剂三：荧光PCR专用模板稀释液（1 mL）
试剂四：含麸质谷物源性探针法qRT-PCR引物混合液（100μL）
试剂五：含麸质谷物源性qRT-PCR探针（50μL）
试剂六：阳性对照（1×10⁸拷贝/μL，50μL）
说明书：1份
注：本试剂盒可完成50次20μL体系的反应，仅限科研使用，不可用于临床诊断。
储存条件
运输：低温运输（-20℃）。
保存：-20℃避光保存，有效期12个月。
自备试剂
样品RNA提取试剂（推荐柱式病毒RNA提取试剂盒）。
超纯水（用于阴性对照）。
使用方法
标准曲线制备
使用阳性对照进行10倍梯度稀释（10²~10⁷拷贝/μL），标记为2~7号管，冰上保存备用。
RNA提取
建议设置N+2个样本（含阳性/阴性对照），采用兼容的RNA提取方法纯化样本。
PCR反应体系（20μL）
按以下比例配制：
| 成分 | 样品管（μL） | 阴性对照（μL） | 标准曲线管（μL） |
| qRT-PCR缓冲液 | 10 | 10 | 10 |
| 酶混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 探针 | 1 | 1 | 1 |
| 引物混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 样本RNA/标准品/水 | 5 | 5（水） | 5（标准品） |
反应程序
逆转录：50℃ 30分钟
预变性：94℃ 10分钟
PCR循环（40次）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM通道信号）。
数据分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。
定性检测：阴性对照Ct值≥40时，样本Ct值≤35判为阳性。
注意事项
操作需在独立区域进行，避免交叉污染。
阳性对照为无传染性DNA片段，不可直接接触活体样本。
若需大规模检测，推荐选择50T/盒规格，灵敏度可达100拷贝/反应。
产品参数
最低检测限：100拷贝/反应
线性范围：10²~10⁷拷贝/μL
特异性：不与非麸质源性DNA发生交叉反应。
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