鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Fish-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5327 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR（qPCR）技术，专为检测食品、生物样本或其他材料中的裸盖鱼源性成分设计。通过特异性引物和探针靶向裸盖鱼保守基因序列，实现高灵敏度、高特异性的定性与定量检测，适用于科研领域。
产品参数
规格：50T/盒（20μL反应体系）
检测方法：实时荧光定量PCR（TaqMan探针法）
灵敏度：
混合样品中裸盖鱼成分检测下限：0.01%（w/w）
核酸浓度检测下限：0.1 ng/μL
线性范围：定量检测时覆盖至少5个数量级（10^1–10^6拷贝/μL）。
保存条件：-20℃避光保存，有效期12–24个月。
试剂盒组成
核心组分：
2× Probe qPCR MasterMix（含热启动DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等）
裸盖鱼特异性引物-探针干粉（FAM标记，BHQ淬灭）
阳性对照（1×10^7拷贝/μL裸盖鱼DNA片段）
阴性对照（无核酸酶水）
荧光PCR专用模板稀释液
辅助材料：
使用说明书（含标准曲线制备方法）
实验流程
1. 标准曲线制备（定量检测）
稀释阳性对照：按10倍梯度稀释（10^1–10^6拷贝/μL），独立操作避免污染。
加样体系：
| 成分 | 体积（μL） |
| 2× Probe MasterMix | 10 |
| 引物-探针混合液 | 3 |
| 模板DNA/标准品 | 7 |
2. 样本DNA提取
推荐使用商品化DNA提取试剂盒，避免交叉污染。
阴性/阳性对照需同步提取。
3. PCR扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 45 |
| | 60℃ | 60 sec（采集FAM信号） |
4. 数据分析
定量分析：通过标准曲线计算样本拷贝数。
定性分析：
阳性判定：Ct值＜40，且扩增曲线符合指数增长。
阴性判定：无Ct值或Ct值≥40。
注意事项
操作规范：
分设试剂配制区、样本处理区、扩增区，使用滤芯吸头。
避免反复冻融试剂，分装保存。
质量控制：
每批次实验需包含阴/阳性对照。
标准曲线R²应≥0.98。
适用范围：仅限科研用途，不适用于临床诊断。
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