预期用途
用于白薇核酸的定性或定量检测，适用于科研用途，不适用于临床诊断。
产品名称 | 白薇探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Radix Cynanchi Atrati Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5198 |
检验原理
基于TaqMan探针法实时荧光PCR技术，针对白薇基因保守区域设计特异性引物及探针。探针5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团，PCR扩增时Taq酶切割探针释放荧光信号，通过荧光定量PCR仪监测信号强度，实现靶序列的定性与定量分析。
试剂盒组成
| 组分名称 | 规格/包装量 |
| 白薇扩增液 | 25μL ×1管 |
| 白薇反应液 | 975μL ×1管 |
| 阳性质控品（人工DNA片段） | 50μL ×1管（1×10^8拷贝/μL） |
| 阴性质控品 | 50μL ×1管 |
| 说明书 | 1份 |
注意：不同批号组分不可混用，避免反复冻融（≤7次）。
储存与运输
储存条件：-20℃±5℃避光保存，有效期12个月。
运输条件：低温（-20℃）运输，避免高温或反复冻融。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪（如ABI系列、Bio-Rad CFX、LightCycler等），需配合无核酸酶耗材（离心管、滤芯吸头等）。
样本要求
样本类型：全血、血清、组织（如肠道）、拭子等。
处理要求：
短期保存：-20℃；长期保存：-70℃（≤6个月）。
运输：2~8℃冰袋，禁止反复冻融。
核酸提取：推荐使用商品化DNA提取试剂盒。
操作步骤
标准曲线制备（定量检测需选做）：
将阳性质控品10倍梯度稀释（10^1~10^7拷贝/μL），分装至标记管中。
PCR反应体系配制（20μL/反应）：
| 组分 | 体积/反应 |
| 反应液 | 10μL |
| 酶混合液 | 2μL |
| 探针 | 1μL |
| 引物混合液 | 2μL |
| 模板DNA/标准品/对照 | 5μL |
PCR扩增程序：
预变性：95℃ 3分钟；
40循环：95℃ 15秒 → 55-60℃ 30秒（采集FAM通道信号）。
结果判读
定性检测：
阳性：Ct值≤35，扩增曲线呈S型；
阴性：Ct值≥40或无扩增；
可疑（35<Ct<40）：需复检。
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴计算样本浓度。
注意事项
实验分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区），避免污染。
阳性对照需最后加样，防止气溶胶污染。
本产品仅限科研使用，严禁用于临床。
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