产品概述
本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术，通过特异性引物和TaqMan探针实现对白附子（Rhizoma typhonii）DNA/RNA的高灵敏、高特异性检测。适用于定性或定量分析，线性范围达5个数量级（10^1–10^7拷贝/μL）。
产品名称 | 白附子探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Rhizoma Typhonii Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5207 |
试剂盒成分
探针法qPCR缓冲液（500μL）
qPCR酶混合液（50μL）
荧光PCR模板稀释液（1mL）
引物-探针干粉（50T）
阳性对照（10^7拷贝/μL，50μL）
生物版本：
qRT-PCR缓冲液（500μL）
酶混合液（100μL）
引物混合液（100μL）
qPCR探针（50μL）
阳性对照（10^8拷贝/μL，50μL）
操作流程
标准曲线制备（6个10倍梯度稀释）：
使用阳性对照依次稀释至10^1–10^6拷贝/μL或10^2–10^7拷贝/μL，独立操作避免污染。
样本制备：
提取待测样本DNA/RNA，推荐配套提取试剂盒，设置阴性/阳性对照。
qPCR反应体系（20μL）：
| 成分 | 样本管 | 阴性对照 | 标准曲线管 |
| qPCR缓冲液 | 10μL | 10μL | 10μL |
| 酶混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |
| 探针/引物混合液 | 1–2μL | 1–2μL | 1–2μL |
| 模板 | 5μL | — | — |
| 标准稀释液/超纯水 | — | 5μL | 5μL |
反应程序：
逆转录（50℃ 30min，若检测RNA）→ 预变性（94℃ 10min）→ 40循环（94℃ 15s，60℃ 1min，采集FAM信号）。
数据分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。
定性检测：Ct≤39为阳性，≥40为阴性；临界值（39–40）需复测。
注意事项
严格分区操作（样本处理、试剂配制、扩增），避免交叉污染。
使用带滤芯枪头，反应液避光保存，避免气泡。
实验后需用10%次氯酸或75%乙醇消毒工作台。
检测局限性：
基因突变或提取效率差异可能导致假阴性；
污染可能导致假阳性。
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