产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专用于白芍（Radix Paeoniae Alba）的快速、高特异性核酸鉴定。通过优化引物和探针设计，可实现对白芍DNA的高灵敏度检测，适用于科研用途的定性或定量分析。
产品名称 | 白芍探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Radix Paeoniae Alba Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5200 |
产品特点
即开即用：预混反应体系，仅需提供样品DNA模板。
高灵敏度与特异性：引物针对白芍高度保守区设计，避免与其他微生物DNA交叉反应。
双重检测模式：支持定性（阴阳性判定）和定量（标准曲线法）分析，线性范围达5个数量级。
内置对照：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，区分假阴性结果。
实验流程
1. 标准曲线制备（以6个10倍稀释梯度为例）
稀释操作：在独立洁净区进行，避免污染。
标记离心管（6至1号），依次加入45μL荧光PCR模板稀释液。
从最高浓度阳性对照（1×10^7拷贝/μL）开始梯度稀释，每次取5μL至下一管，震荡混匀后冰上保存。
2. 样品DNA制备
建议设置阴性对照（NC，纯水）和阳性对照（PC，阳性对照稀释液）。
使用兼容的RNA/DNA提取试剂盒纯化样本，或选用配套核酸释放剂。
3. 荧光定量PCR反应（20μL体系）
体系配置：
定量分析：N+9个反应管（样本、阴性对照、标准曲线）。
定性分析：N+4个反应管（样本、阴阳性对照）。
程序设置：按仪器要求设定扩增条件（预变性、退火/延伸等步骤）。
4. 数据分析
定量检测：以阳性对照log浓度为横轴，Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算样本浓度。
定性检测：
阳性判定：Ct≤36，典型扩增曲线；阴性判定：Ct≥40或无Ct值。
灰区结果（36<Ct<40）需复测确认。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，防止交叉污染。
防污染措施：使用带滤芯枪头，实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面。
试剂保存：避光解冻后短暂离心混匀，避免反复冻融。
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