鸵鸟源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 鸵鸟源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Ostrich-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5336 |
预期用途
本试剂盒基于TaqMan探针法，通过特异性扩增鸵鸟源性成分的保守基因序列，用于食品、饲料或生物样本中鸵鸟源性成分的定性与定量检测，适用于科研、市场监管及物种鉴定，不适用于临床诊断。
技术原理
探针设计：针对鸵鸟基因组高度保守区域设计引物及FAM标记探针，确保特异性。
热启动酶：采用Hot Start Taq DNA聚合酶，减少非特异性扩增。
防污染体系：含UNG酶（部分型号），可降解残留PCR产物，避免假阳性。
荧光信号：通过实时监测扩增曲线Ct值，结合标准曲线实现准确定量。
试剂盒组分
| 组分名称 | 规格/包装 |
| 2×Probe qPCR预混液 | 500 μL |
| 鸵鸟特异性引物混合液 | 100 μL |
| 鸵鸟特异性探针（FAM） | 50 μL |
| 阳性质控品（人工DNA） | 50 μL |
| 阴性质控品（无核酸水） | 50 μL |
| 模板稀释液 | 1 mL |
操作流程
样本处理
提取样本DNA（推荐使用商品化提取试剂盒，避免污染）。
阳性/阴性对照与待测样本同步处理。
反应体系配制（20 μL/反应）
| 试剂 | 体积 |
| 2×Probe预混液 | 10 μL |
| 引物混合液 | 0.8 μL|
| 探针 | 0.2 μL|
| 模板DNA | 5 μL |
PCR扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| | 55℃ | 30 sec | |
结果判读
阳性：Ct值≤35，扩增曲线呈指数增长。
可疑：35<Ct≤38，需复测确认。
阴性：无Ct值或曲线无指数期。
性能参数
灵敏度：最低检测限1.0×10³ copies/mL。
特异性：不与常见禽类或哺乳动物源性成分交叉反应。
精密度：批内/批间CV≤3%。
注意事项
分区操作（试剂配制、样本处理、扩增），避免交叉污染。
反应液避光保存，避免反复冻融。
实验废弃物需经消毒处理（10%次氯酸或75%乙醇）。
若扩增曲线异常，需检查仪器通道设置（FAM检测，无淬灭通道）。
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