产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量RT-PCR技术，专用于检测小反刍兽疫病毒（PPRV）野毒株RNA。适用于科研领域（如病毒溯源、流行病学调查），不用于临床诊断。
产品名称 | 小反刍兽疫病毒野毒株探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Peste des Petits Ruminants Virus Wild Strain Probe-based Real-time RT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5221 |
产品特点
高灵敏度：优化引物与探针，检测限低至50拷贝/μL。
强特异性：靶向病毒基因组高度保守区，避免与其他病原体交叉反应。
即开即用：用户仅需提供样品RNA模板，操作流程标准化。
防污染设计：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，降低实验风险。
兼容性：支持常见RNA提取方法（如柱式提取试剂盒）。
规格与成分
| 成分编号 | 成分名称 | 规格 | 包装颜色 |
| 试剂一 | 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500 μL | 蓝盖 |
| 试剂二 | 探针法qRT-PCR酶混合液 | 100 μL | 红盖 |
| 试剂三 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 黄盖 |
| 试剂四 | PPRV野毒株引物混合液 | 100 μL | 白盖 |
| 试剂五 | PPRV野毒株qRT-PCR探针 | 50 μL | 棕色管 |
| 试剂六 | 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL | 黄盖 |
| - | 使用说明书 | 1份 | - |
储存与运输
储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
运输方式：低温运输（干冰或冰袋）。
实验步骤
1. 标准曲线制备（10²~10⁷拷贝/μL梯度）
标记离心管（7~2号），依次用阳性对照进行10倍稀释（每步换枪头）。
稀释后冰上保存，避免反复冻融。
2. 样品RNA制备
建议设置阳性对照（PC）和阴性对照（NC），提取方法需兼容病毒RNA。
3. qRT-PCR反应（20 μL体系）
反应体系：
样品管：10 μL缓冲液 + 2 μL酶混合液 + 1 μL探针 + 2 μL引物 + 5 μL RNA模板。
阴性对照：以超纯水替代模板。
标准曲线管：加入对应梯度稀释液。
反应程序：
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 逆转录 | 50℃ | 30 min |
| 预变性 | 94℃ | 10 min |
| 40循环 | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号） |
数据分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样品浓度。
定性检测：阴性对照Ct值≥40方可判读，阳性样本需显著低于阈值。
注意事项
操作需在独立洁净区域进行，避免气溶胶污染。
阳性对照为高浓度标准品，稀释时需严格分区操作。
本产品仅限科研使用，检测结果需结合其他方法验证。
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