荧光素酶/GFP标记的人多发性骨髓瘤细胞;MM.1S-Luc-GFP
产品信息:

1. 细胞基本档案
特征维度 详细信息
亲本来源 人多发性骨髓瘤细胞 (MM.1S)
修饰方式 慢病毒转染携带 Luc + GFP 双基因
标记物 稳定表达荧光素酶 + 绿色荧光蛋白
抗性筛选 通常携带嘌呤霉素 (Puromycin) 或其他抗性基因
种属/性别 人 (女性,非裔美国人)
组织来源 外周血 (来源于对类固醇耐药患者的外周血)
产品名称 | 荧光素酶/GFP标记的人多发性骨髓瘤细胞;MM.1S-Luc-GFP | 英文名称 | MM.1S-Luc-GFP:MM1SLucGFP |
货号 | AXB10555 | 生长特性 | 贴壁生长 |
核心特性与应用

为什么要选择MM.1S-Luc-GFP?
相比于单一标记,双标记(Luc + GFP)提供了更灵活的检测手段。
双重检测优势:
Luc(体内): 用于活体成像(IVIS),监测小鼠体内的肿瘤负荷、骨髓浸润及药物疗效。
GFP(体外/显微镜): 用于流式细胞术(FACS)分选或计数,以及在荧光显微镜下直接观察细胞形态和吞噬情况。
地塞米松敏感性: MM.1S亲本细胞对地塞米松(Dexamethasone)敏感,这使其成为研究多发性骨髓瘤类固醇敏感性及耐药机制(与MM.1R对比)的经典模型。
免疫表型: 表达CD38, CD52, CD59等骨髓瘤标志物,不表达CD19/CD20。
培养操作手册(保姆级)
基础培养条件
培养基: RPMI-1640 基础培养基。
血清: 10% 优质胎牛血清 (FBS)。
添加剂: 1% 青霉素-链霉素 (P/S)。
环境: 37℃,5% CO,饱和湿度培养箱。
传代操作 (关键难点:半贴壁)

MM.1S细胞既有悬浮生长的,也有贴壁不牢的。传代时必须将两者都收集起来,否则细胞活性会大幅下降。
收集悬浮细胞: 轻轻吹打T25培养瓶,将悬浮的细胞和培养基转移到离心管中。
处理贴壁细胞:
弃去上清(已收集),用PBS轻轻润洗贴壁细胞一次(润洗液也要收集到离心管中,因为会有细胞脱落)。
加入胰酶(Trypsin-EDTA),37℃消化1-2分钟,直到贴壁细胞变圆脱落。
加入完全培养基终止消化,并吹打混匀。
合并: 将步骤1和步骤2的所有液体合并到一个离心管中。
离心: 1000 rpm (约200-300g) 离心 5-10 分钟。
重悬: 弃上清,加入新鲜完全培养基重悬。
分瓶: 按 1:2 至 1:4 的比例传代。
冻存与复苏
冻存液: 90% 血清 + 10% DMSO,或者专用无血清冻存液。
复苏: 37℃水浴快速摇动融化,离心去除DMSO,重悬接种。
注意: MM.1S细胞复苏后生长较慢,通常需要 2周左右 才能恢复正常的生长状态和对数增殖,请耐心等待,不要频繁换液。
MM.1S-Luc-GFP 特有注意事项

抗生素维持(关键):
为了维持Luc和GFP基因的稳定表达,防止长期培养后荧光丢失,建议在培养基中添加筛选药物(通常是 Puromycin 嘌呤霉素)。具体浓度请参考你构建细胞时的MOI值或购买说明书(通常在 1-2 μg/mL 左右)。
细胞状态监控:
该细胞容易成团,传代时要吹打均匀。
黑点较多是此类细胞的常态,只要不是细菌或真菌污染,及时换液即可。
STR鉴定:
建议定期进行STR鉴定,确保细胞系没有发生交叉污染。
总结
MM.1S-Luc-GFP = MM.1S (地塞米松敏感) + Luc (活体定量) + GFP (流式/显微镜追踪)。
它是一个功能强大的双报告基因工具,特别适合需要同时进行体内药效评价(用Luc)和体外机制验证(用GFP流式分选)的多发性骨髓瘤研究项目。
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注意事项与应用
无菌操作:必须严格无菌无毒,避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求:需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等,动物细胞还需血清。
抗生素使用:可添加双抗或三抗预防污染,但长期培养不建议持续使用,以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具,可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
关键字: MM.1S-Luc-GFP;荧光素酶/GFP标记的人多发性骨髓瘤细胞;贴壁细胞;
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