荧光素酶标记的人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞;RPMI 8226-Luc
产品信息：
这是一份关于荧光素酶标记的人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞（RPMI 8226-Luc）的详细说明、细胞特性及标准培养操作指南。
该细胞系是在经典的 RPMI 8226 细胞（人多发性骨髓瘤细胞）基础上，通过慢病毒转染等基因工程手段，稳定转染了荧光素酶（Luciferase, Luc）报告基因。它保留了亲本细胞的生物学特性，同时具备了生物发光能力，是多发性骨髓瘤肿瘤生长、药物筛选及活体成像研究中的重要工具。
细胞基本信息
种属来源：人（Homo sapiens）
供体信息：61岁男性，浆细胞瘤患者
组织来源：外周血（Peripheral Blood）
标记基因：荧光素酶（Luciferase），通常伴随嘌呤霉素（Puromycin）抗性基因。
产品名称 | 荧光素酶标记的人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞;RPMI 8226-Luc | 英文名称 | RPMI 8226-Luc：RPMI8226Luc |
货号 | AXB10594 | 生长特性 | 贴壁生长 |
疾病特征：多发性骨髓瘤（Multiple Myeloma），产生 IgG lambda 型免疫球蛋白。
细胞特性与应用
特征维度 详细描述
背景简介 RPMI 8226 细胞于1966年建系，是研究多发性骨髓瘤最常用的细胞系之一。它仅产生和分泌 lambda 型轻链，不分泌重链。
荧光特性 稳定表达荧光素酶，加入底物 D-luciferin 后可产生生物发光，适用于活体成像（In Vivo Imaging）和体外药敏实验。
筛选维持 为了维持荧光素酶基因的稳定表达，通常需要在培养基中添加嘌呤霉素（Puromycin）进行筛选（具体浓度需参考供应商说明书，通常为 1-10 μg/mL）。
主要应用 1. 多发性骨髓瘤肿瘤生长与药物筛选。
免疫学与免疫系统疾病研究。
转染宿主细胞。
推荐培养体系
基础培养基：RPMI-1640
血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)
双抗添加：1% 青霉素-链霉素 (P/S)
筛选维持：Puromycin (嘌呤霉素)，推荐浓度通常为 1-10 μg/mL（具体浓度请参考购买时的说明书）。
培养环境：
温度：37℃
气体环境：95% 空气 + 5% CO
湿度：维持培养箱内湿度 >90%。
详细培养操作指南
1. 细胞复苏 (Thawing)
预热：将水浴锅调至 37℃，预热完全培养基。
解冻：从液氮中取出冻存管，迅速放入 37℃ 水浴中，轻轻摇晃，使其在 1-2 分钟内 快速融化。
转移：用 75% 酒精擦拭冻存管外壁消毒，转入超净台。
稀释：将细胞悬液缓慢加入含有 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中（稀释 DMSO 毒性）。
离心：1000 rpm (约 250g) 离心 3-5 分钟。
接种：弃上清，加入新鲜完全培养基（含嘌呤霉素）重悬，接种至 T25 培养瓶中，放入培养箱静置培养。
细胞传代 (Passage)
RPMI 8226-Luc 主要为悬浮生长。
观察：当细胞密度达到 cells/mL（或镜下观察密度过高，培养基变黄）时进行传代。
收集：直接将细胞悬液转移至离心管中。
离心：1000 rpm 离心 3-5 分钟。
换液：弃去上清液，加入新鲜完全培养基重悬。
分瓶：按 1:2 至 1:3 的比例分装到新的培养瓶中。
注意：该细胞生长相对较慢，倍增时间较长，请耐心培养。
细胞冻存 (Freezing)
状态选择：选择对数生长期、活力好、形态佳的细胞。
计数：收集细胞，离心后重悬，进行细胞计数。
冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用无血清冻存液。
密度：调整细胞密度至 cells/mL。
程序降温：分装入冻存管，使用程序降温盒（-80℃ 过夜），然后转入液氮罐长期保存。
关键注意事项
荧光维持（重点）：RPMI 8226-Luc 细胞在长期传代过程中，荧光素酶的表达可能会丢失。因此，必须在平时的培养基中添加筛选抗生素（嘌呤霉素）以维持压力。若发现荧光明显变弱，可进行短期的高浓度抗生素筛选。
生长缓慢：该细胞系生长速度较慢，倍增时间较长（约 48-72 小时），请耐心观察，不要误以为细胞状态不好而频繁换液或过度稀释。
半贴壁特性：虽然 RPMI 8226 主要是悬浮细胞，但在培养过程中常伴有部分贴壁细胞（有时可达 50%）。传代时，需将悬浮细胞和贴壁细胞分别收集并混合后离心传代。
细胞脆弱：该细胞比较脆弱，容易死亡并产生细胞碎片或黑点。换液时建议用 PBS 润洗去除碎片，吹打操作应轻柔，避免机械损伤。
无菌操作：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌操作。建议定期检测支原体，确保细胞无污染。
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注意事项与应用无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。
抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
关键字： RPMI 8226-Luc;荧光素酶标记的人多发性骨髓瘤外周血B淋巴;贴壁细胞;
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