Omono 河病毒检测试剂盒
病毒背景与临床意义:
病毒特性:Omono 河病毒(ORV)是一种新发现的虫媒病毒,属于黄病毒科。它与乙型脑炎病毒(JEV)和西尼罗病毒(WNV)存在抗原交叉反应。
产品名称 | Omono 河病毒检测试剂盒 | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1639 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
传播与分布:主要在日本秋田县小野川流域的蚊虫(库蚊)和野生啮齿动物中分离发现。
检测意义:由于其与乙脑病毒等具有相似性,且可能引起发热、神经系统症状等,准确区分ORV与其他黄病毒对于流行病学调查和精准治疗至关重要。
检测原理与技术参数
目前市面上的Omono河病毒检测试剂盒主要采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术。
核心原理:
靶基因:针对ORV基因组中非结构蛋白NS5基因的保守区域设计特异性引物和TaqMan探针。
特异性:该设计能够特异性扩增Omono河病毒,避免与乙型脑炎病毒(JEV)、西尼罗病毒(WNV)等相近病毒发生交叉反应。
主要技术参数:
检测方法:一步法荧光RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)。
出结果时间:约1.5 - 2小时。
试剂盒组成与保存
包装规格:通常为48T或50T(次反应)。
主要组分:
PCR反应液:含dNTPs、Mg2、缓冲液。
酶混合液:含逆转录酶和Taq DNA聚合酶。
引物/探针混合液:特异性识别ORV。
阴性对照:无菌生理盐水或ddHO。
保存条件:-20℃避光保存,低温运输。避免反复冻融。
操作流程详解
第一步:样本采集
样本类型:通常为咽拭子、血液或脑脊液(视具体研究目的而定)。
处理:将拭子放入含病毒保存液(VTM)的采样管中,充分震荡洗脱。
第二步:核酸提取
使用病毒RNA提取试剂盒(磁珠法或柱提法)提取样本中的总RNA。
注意:需设置空白提取对照,防止提取试剂污染。
第三步:PCR反应体系配置 (20 μL体系)
在冰浴上配制混合液:
2× qPCR Mix:10 μL
引物/探针:1 μL
酶混合液:0.4 - 1 μL
模板RNA:5 - 10 μL
无核酸酶水:补足至20 μL
第四步:上机扩增
仪器设置:荧光通道选择FAM(或根据探针标记调整)。
反应程序:
逆转录:50℃ (或42℃) 30分钟。
预变性:95℃ 5分钟。
循环扩增:95℃ 15秒 → 60℃ 30-60秒 (采集荧光),进行40-45个循环。
结果判读标准
结果类型 判读标准 (Ct值) 扩增曲线特征
阳性 (+) Ct值 38 曲线呈典型的“S”型,且有明显的指数扩增期。
可疑 (±) 38 ≤ Ct值 40 荧光信号微弱,建议重新提取核酸或复核。
阴性 (-) Ct值 = 40 或 无 Ct 值 无扩增曲线,或曲线呈直线。
质控标准(必须满足,实验才有效):
阴性质控品:Ct值 = 40(无扩增),无非特异性扩增。
阳性质控品:Ct值 ≤ 35,且扩增曲线正常。
关键注意事项
防污染:PCR实验室必须严格分区。阳性对照含有高浓度病毒核酸,极易造成环境污染,操作时需格外小心,加样后立即丢弃吸头。
试剂处理:试剂使用前需充分震荡混匀并瞬时离心,避免管壁残留。避免反复冻融,以免酶活性下降。
适用范围:目前市面上的Omono河病毒检测试剂盒,大部分属于科研试剂(RUO),主要用于流行病学调查和基础研究,不可直接用于临床诊断,除非该产品已获得相应的医疗器械注册证。
假阴性风险:若样本采集时间过晚、病毒载量低于检测限,或RNA提取失败,均可能导致假阴性结果。
公司正在出售的产品:
肝素结合性表皮生长因子抗体 | 真菌/酵母磷脂酶D2(Phospholipase D2)活性比色法定量检测试剂盒 |
重组金黄色葡萄球菌蛋白A抗体 | 载玻片细胞BAX蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
通用转录因子IIF亚基2/TFIIF RAP 30抗体 | 血液氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性荧光定量检测试剂盒 |
链霉素抗体 | TRA2A蛋白抗体 |
细胞切割酶/β分泌酶(MENAPSIN 2;β-SECRETASE)活性 | L3MBTL3蛋白抗体 |
Phalloidin-FITC标记法细胞凋亡检测试剂盒 | EVPLL蛋白抗体 |
冰冻切片组织组蛋白荧光显微镜检测试剂盒 | 镁转运蛋白NIPA2抗体 |
IGF 蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | 电压依赖性钙通道蛋白抗体 |
乳品D-葡萄糖酸内脂比色法定量检测试剂盒 | 抑癌蛋白DKK3抗体 |
细胞甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法 | Alexa Fluor® 647标记人FOXP3单克隆抗体 |
钙(Calpain) | Omono 河病毒检测试剂盒冰冻切片结缔组织(CONNECTIVE TISSUE)马森(MASSON) |
组织HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病毒定量PCR | AF750标记的程序性死亡配体1(CD274)抗体 |
甲基丙二酸尿症和高胱氨酸尿症C型蛋白同源抗体 | PE标记人CD127 (IL7R)单克隆抗体 |
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