H7N9 亚型禽流感病毒检测试剂盒 / 含内标
1. 产品概述与应用:
产品名称 | H7N9 亚型禽流感病毒检测试剂盒 / 含内标 | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1656 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
产品名称: H7N9亚型禽流感病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法,含内标)。
检测目标:
FAM通道: H7N9病毒特异性基因(通常为HA或NA基因)。
VIC/HEX通道: 内标基因(Internal Control)。
主要应用:
临床诊断: 辅助诊断人或禽类是否感染H7N9禽流感病毒。
流行病学调查: 疫情监测与溯源。
科研用途: 病毒载量测定、药物评价等。
2. 检测原理
该试剂盒采用双重实时荧光定量RT-PCR(TaqMan探针法)技术:
双重反应: 在同一个PCR反应管中,同时进行H7N9病毒检测和内标检测。
荧光标记:
FAM通道: 标记H7N9特异性探针。若样本中有H7N9病毒,该通道会扩增并发出荧光。
VIC/HEX通道: 标记内标(IC)探针。无论样本中是否有病毒,该通道都应正常扩增。
内标作用:
内源性内标: 检测人/动物样本中的管家基因(如β-actin),用于确认样本采集是否成功(如拭子是否刮到了细胞)。
外源性内标: 检测加入的外部质控品,用于确认提取试剂和PCR仪是否正常工作。
3. 试剂盒组成 (以50测试规格为例)
组分名称 规格/体积 保存条件 功能说明
PCR反应液 含引物、探针、dNTPs -20℃避光 预混液,包含检测H7N9和内标的引物探针
酶混合液 含逆转录酶、Taq酶 -20℃ 催化逆转录和PCR扩增
阳性对照 1管 -20℃ 含H7N9目的基因的质粒或灭活病毒
阴性对照 1管 4℃或-20℃ 无菌生理盐水
内标(IC) (通常已预混或单独提供) -20℃ 用于监控提取和扩增过程
4. 操作流程详解
第一步:样本采集
样本类型: 鼻咽拭子、口咽拭子、痰液、肺泡灌洗液、血清或禽类组织/泄殖腔拭子。
保存: 采集后立即放入病毒采样管,2-8℃保存并尽快送检;长期保存需置于-70℃。
第二步:核酸提取
方法: 使用配套的病毒RNA提取试剂盒。
关键点: 如果试剂盒要求“内标参与提取”,则需在提取前向样本中加入内标溶液,使内标与病毒核酸一同经历提取过程。
第三步:PCR反应体系配制
解冻: 将反应液和酶液在冰上解冻,振荡混匀并瞬时离心。
配制: 按说明书比例混合反应液和酶液。
分装: 将混合液分装至PCR反应管中。
第四步:加样
向反应管中加入提取好的RNA模板(通常为5-10 μL)。
第五步:上机扩增
仪器: ABI 7500、LightCycler 480等。
通道设置:
Reporter Dye: FAM (H7N9), VIC/HEX (内标)
Quencher Dye: None
程序(参考):
逆转录:42℃-50℃,10-15分钟。
预变性:95℃,3-5分钟。
PCR循环:95℃ 15秒,60℃ 30-45秒(采集荧光),40-45个循环。
5. 结果判读标准
有效实验判定:
阴性对照: FAM通道无Ct值,VIC通道(内标)应无Ct值或Ct值异常(取决于内标类型)。
阳性对照: FAM通道Ct值 ≤ 35,且扩增曲线正常。
公司正在出售的产品:
钙敏感受体1抗体 | 细菌(AMYLASE)定性检测试剂盒 |
转移生长因子α抗体 | 冰冻切片组织TNF BETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
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饮料环(cyclamate)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 | H7N9 亚型禽流感病毒检测试剂盒 / 含内标免疫细胞化学AP酶联NBT/BCIP间接检测试剂盒(含AP二抗) |
16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 | 天青素/肝素结合蛋白单克隆抗体 |
激活素受体1B抗体 | PE-Cy5标记人CD43单克隆抗体 |
关键字: H7N9 亚型禽流感病毒;检测试剂盒;含内标;
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