丙酮酸(PA)含量测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
丙酮酸通过乙酰 CoA 连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢,起着重要的枢纽作用。
测定原理:
丙酮酸与 2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在碱性溶液中呈色。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。测定步骤:1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 520nm,蒸馏水调零。
2、取 300 μL 样本+100 μL 试剂一于 1.5mL EP 管中,混匀,静置 2min,加入 500 μL 试剂二,混匀,于 520nm波长处测定管吸光值 A。
注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
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