线粒体异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)测定试剂盒/分光光度法/48样

线粒体异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)测定试剂盒/分光光度法/48样

测定意义：

ICDHm（EC 1.1.1.41 ）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，在三羧酸循中催化异柠檬酸生成 α-酮戊二酸，同时将 NAD+   还原为 NADH，是三羧酸循环的限速酶之一，其催化的反应是细胞 NADH主要来源之一。

测定原理：

ICDHm 催化 NAD+ 还原生成 NADH ，导致 340nm 处光吸收上升。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

测定步骤：
1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 340nm 处，蒸馏水调零。

2、工作液于37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）孵育 5min。

3、在1mL石英比色皿中依次加入 60μL 试剂七、80μL样本和1mL工作液，混匀，立即记录 340nm 处 20s时的吸光值 A1 和 2min20s 时的吸光值A2 ，计算ΔA=A2-A1。

注 意：

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。