游离胆固醇(FC)含量测定试剂盒/微量法/96S
测定意义:
FC 是构成细胞膜的主要成分,也是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素 D等生理活性物质的重要原料。FC 浓度可作为脂代谢的指标。
测定原理:
FC 氧化酶催化 FC 生成△4-胆甾烯酮和 H2O2,过氧化物酶催化 H2O2、4-氨基安替比林和酚生成红色醌类化合物,在 500nm 有吸收峰,其颜色深浅与 FC 含量成正比。
自备仪器和用品:
水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96 孔板、异丙醇和蒸馏水。
测定操作:
1. 酶标仪预热 30 min ,调节波长到 500 nm。
2. FC 工作液的配制:临用前,吸取约 0.8mL 试剂二分别加入试剂三和试剂四瓶中,充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中,充分混匀,FC 工作液置于 37℃水浴 10min 。用不完的工作液 4℃保存一周。
3. 标准管:依次在 96 孔板中加入 20μL FC 标准液和 180μL FC 工作液,混匀,37℃静置 3h 后于 500nm 测定 A 标准管。
4. 测定管:依次在 96 孔板中加入 20μL FC 待测液和 180μL FC 工作液,混匀,37℃静置 3h 后于 500nm 测定 A 测定管。
5. 空白管:依次在 96 孔板中加入 20μL 试剂一和 180μL FC 工作液,混匀,37℃静置 3h 后于 500nm 测定A 测定管。
注 意:
1、标准管和空白管只要做一管。
2、若测定管产生白色浑浊,可以将待测液用异丙醇稀释 2~5 倍后测定,并在最后结果乘以相应倍数。
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