总胆固醇(TC)含量测定试剂盒/微量法/96S
测定意义:
TC 包括游离胆固醇和胆固醇酯。TC 是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。
测定原理:
利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),从而把胆固醇酯转化为FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化,生成△4-胆甾烯酮和 H2O2;最后利用过氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物;在 500nm 有特征吸收峰,其颜色深浅与 TC 含量成正比。
自备仪器和用品:
水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96 孔板。测定操作:
1. /酶标仪预热 30 min ,调节波长到 500 nm。
2. TC 工作液的配制:临用前,吸取约 0.8mL 试剂二分别加入试剂三和试剂四瓶中,充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中,充分混匀,TC 工作液置于 37℃水浴 10min 。用不完的工作液 4℃保存一周。
3. 标准管:依次在 96 孔板中加入 20μL FC 标准液和 180μL TC 工作液,混匀,37℃静置 3h 后于 500nm 测定 A 标准管。
4. 测定管:依次在 96 孔板中加入 20μL FC 待测液和 180μLTC 工作液,混匀,37℃静置 3h 后于 500nm 测定 A 测定管。
5. 空白管:依次在 96 孔板中加入 20μL 试剂一和 180μLTC 工作液,混匀,37℃静置 3h 后于 500nm 测定 A测定管。注 意:
标准管和空白管只需测定一次。
上海酶联生物科技有限公司
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