人弥漫大B淋巴瘤细胞；WSU-DLCL-2

人弥漫大B淋巴瘤细胞；WSU-DLCL-2

商品属性

来源：1990年从一名41岁男性复发型B细胞非霍奇金淋巴瘤患者的胸腔积液中建立，属于弥漫性大细胞淋巴瘤非裂解型（中级-滤泡小裂解细胞转化亚型），EBV阴性。

核心遗传特征：携带EZH2 Y641F突变（组蛋白甲基转移酶EZH2的热点突变，与淋巴瘤表观遗传调控异常密切相关），外显子和RNA序列数据已公开（参考文献18187）。

形态与生长特性：

形态：圆形、椭圆形，单独生长或悬浮成小团块

生长方式：悬浮生长（需离心收集，不可直接倾倒培养液）

倍增时间：每周传代2-3次

培养条件

培养基 RPMI-1640 + 10%胎牛血清 + 1%双抗（青霉素/链霉素）

培养环境 37℃、5% CO₂、湿度70%-80%

传代比例 1:2传代（细胞密度达80%-90%时操作，1000rpm离心5分钟收集细胞）

冻存液 90% FBS + 10% DMSO（现用现配）或无血清冻存液

研究应用

因携带EZH2 Y641F突变，WSU-DLCL-2是研究DLBCL中：

表观遗传调控机制：EZH2突变导致组蛋白H3K27三甲基化异常，进而调控下游靶基因（如抑癌基因沉默）

EZH2抑制剂的敏感性测试：如GSK126、EPZ-6438等靶向药物的体外药效评估

复发/难治性DLBCL模型：模拟临床中EZH2突变型淋巴瘤对常规化疗的耐药性

注意事项

悬浮细胞操作要点：

离心时推荐1000rpm×5分钟，避免离心力过大损伤细胞团块

传代时用新鲜培养基重悬细胞，避免原培养液中代谢废物积累

EZH2突变细胞的特殊性：

培养过程中建议定期检测细胞STR分型（已知STR位点：Amelogenin X,Y；D3S1358 14,16等，详见保藏机构DSMZ: ACC-575）

避免长期连续传代（建议传代不超过20代），防止遗传背景漂移

污染防控：悬浮细胞易聚团，需每周用支原体检测试剂盒筛查，镜检时注意区分细胞团块与真菌污染

传代与冻存

传代比例：建议1:2传代，消化后离心（1000 rpm，4分钟）重悬。

冻存液配方：90% FBS + 10% DMSO，液氮保存。

复苏步骤

快速解冻：37℃水浴中摇晃冻存管，1分钟内完全溶解。

离心去冻存液：加入4 mL培养基，1000 rpm离心4分钟，弃上清。

重悬接种：用1-2 mL培养基重悬细胞，转移至T25瓶或10 cm皿（含8 mL培养基），竖置培养过夜后换液。

质量控制

STR鉴定：已验证梅拉宁基因（X,Y）及多位点STR数据（如D3S1358 14,16等）。

应用限制：仅供科研使用，不可用于临床诊断。
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