β-淀粉酶(β-AL)测定试剂盒/微量法/48样
测定意义:
淀粉酶负责水解淀粉,主要包括 α-淀粉酶和 β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可随机地作用于淀粉中的 α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。
测定原理:
还原糖还原 3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。α-淀粉酶不耐酸,β-淀粉酶不耐热。根据上述特性,钝化其中之一,就可测出另一种淀粉酶的活力。
需自备的的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵和蒸馏水。测定步骤:
试剂名称(μL)
α-淀粉酶活力测定
总淀粉酶活力测定
对照管
测定管
淀粉酶原液
75
70℃水浴 15min 左右,冷却
淀粉酶稀释液
蒸馏水
试剂二
在 40℃恒温水浴中准确保温5min
试剂一
150
混匀,95 度水浴 5min ,冷却,取 200 μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中,540nm 处读取吸光值,从左到右分别记为 A1 、A2 、A3 和 A4。每个测定管需设一个对照管。
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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