粉酶(α-AL)测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
淀粉酶负责水解淀粉,包括 α-淀粉酶和 β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可随机地作用于淀粉中的 α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉的粘度降低,因此又称为液化酶。
测定原理:
还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。β-淀粉酶不耐热,在 70℃钝化 15min,从而测定α-淀粉酶活性。
需自备的的仪器和用品:
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。测定步骤:
试剂(μL)
对照管
测定管
α-淀粉酶原液
250
70℃水浴 15min 左右,冷却
蒸馏水
试剂二
在 40℃恒温水浴中准确保温5min
试剂一
500
混匀,95℃水浴5min,冷却, 540nm 处读取对照管和测定管吸光度,计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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