检验原理
高灵敏度：检测限达100拷贝/反应，引物针对DAEC保守序列设计，避免交叉反应。
双重用途：支持定性与定量分析，定量线性范围≥5个数量级。
即开即用：仅需提供样品DNA模板，含阳性对照（非传染性DNA片段）以排除假阴性。
产品名称
弥散黏附性大肠杆菌（大肠埃希菌）染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Diffusely Adherent E.coli (DAEC) Dye-Based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR2706
使用方法
试剂准备（试剂准备区）
标准曲线制备（以10^1–10^6拷贝/μL为例）：
标记6管（6–1号），每管加45μL模板稀释液。
6号管加5μL 10^7拷贝/μL阳性对照，震荡混匀得10^6拷贝/μL标准品，依次10倍稀释至1号管。
PCR扩增（核酸扩增区）
反应体系：20μL/反应，含DNA模板、预混引物及染料。
仪器设置：
荧光通道：选择FAM（检测通道），无需淬灭通道。
循环参数：
预变性：95℃ 2min（1循环）；
扩增：95℃ 15s → 60℃ 30s（45循环，60℃时采集荧光信号）。
结果分析
阈值设定：调整Baseline（Start 3–15，End 5–20），确保阈值线位于指数扩增期。
判读标准：
阳性：Ct值≤35，扩增曲线呈S型；
阴性：无Ct值或曲线平直。
注意事项
标准品稀释需在独立区域操作，避免污染。
实验分区操作（试剂准备、样本处理、扩增分析），防止交叉污染。
质量控制
阳性对照：应显示典型扩增曲线，Ct值在预期范围内。
阴性对照：无扩增信号。
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