检测原理
基于染料法荧光定量PCR技术，特异性扩增肠粘附性大肠杆菌保守基因序列，结合荧光信号实时定量分析。
产品用途：科研检测（不适用于临床诊断）
产品名称 | 肠粘附性大肠杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Enteroadherent E. coli (EAEC) Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3904 |
产品特点
即开即用：用户仅需提供待测DNA模板。
高灵敏度：检测下限可达几百拷贝/反应。
高特异性：引物针对肠粘附性大肠杆菌保守序列设计，与其他病原体无交叉反应。
一管式检测：闭管操作减少污染风险。
宽线性范围：定量检测覆盖5个数量级（10^2–10^7拷贝/μL）。
规格与组分
| 成分 | 规格/包装量 | 保存条件 |
| 2×qPCR预混液 | 500 μL（含荧光染料） | -20℃避光 |
| 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL | -20℃ |
| 肠粘附性大肠杆菌引物混合物 | 100 μL（干粉或溶液） | -20℃干燥保存 |
| 阳性对照（10^8拷贝/μL） | 50 μL | -20℃单独存放 |
| 使用手册 | 1份 | 常温 |
运输与保存
运输条件：低温干冰运输。
保存期限：-20℃避光保存，有效期12个月。
自备试剂与仪器
仪器：支持染料法的荧光定量PCR仪（需根据机型自备ROX校正液）。
耗材：无核酸酶离心管、带滤芯枪头、冰盒。
操作步骤
1. 阳性对照稀释（示例：10^2–10^7拷贝/μL梯度）
标记6管，依次加入45 μL稀释液，梯度稀释阳性对照（每步换枪头）。
稀释后立即冰上保存，避免反复冻融。
2. PCR反应体系（20 μL/反应）
| 组分 | 体积（μL） |
| 2×qPCR预混液 | 10 |
| 引物混合物 | 2 |
| DNA模板/对照 | 2 |
| 无核酸酶水 | 补足至20 |
3. 扩增程序
预变性：95℃ 3分钟；
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，采集荧光信号）。
注意事项
阳性对照需在独立区域操作，避免污染。
建议重复3次实验以确保数据可靠性。
废弃组分需按生物危害品处理。
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