虾虹彩病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 虾虹彩病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Shrimp Iridovirus Dye-based Quantitative Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR2648 |
产品概述
本试剂盒基于荧光定量PCR技术,专为虾虹彩病毒(Decapod iridescent virus 1, DIV1)的高灵敏度、高特异性检测而设计。采用优化的引物探针系统及阳性内标,确保检测结果的准确性和可靠性,适用于科研用途。
产品组成
预混反应液:含PCR缓冲液、dNTPs、热启动DNA聚合酶等。
引物探针混合液:
上游引物:5’-AATGCTGACGAAATCATCAGTT-3’
下游引物:5’-TCCTTTCCCTCGTTGGAACAA-3’
荧光探针:5’-TACGAATCGTTTCCCGTGAGACCCTTTAACG-3’(5’端FAM标记,3’端BHQ1淬灭基团修饰)。
阳性对照:含虾虹彩病毒靶序列的质粒DNA,用于验证实验有效性。
阴性对照:无核酸酶水,用于排除污染。
RNA提取辅助试剂(可选):部分版本可能包含RNA提取组件。
技术参数
检测方法:染料法荧光定量PCR(探针法)。
灵敏度:可检测低至10拷贝/μL的病毒RNA。
特异性:引物针对虾虹彩病毒高度保守区设计,无交叉反应。
反应体系:20μL/反应,50次/盒。
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月;运输需低温。
操作步骤
RNA提取:使用配套试剂或商业试剂盒提取样品RNA。
反应配制:按说明书比例混合预混液、引物探针、模板RNA及对照。
PCR扩增:
预变性:95℃ 2分钟;
循环:95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(40个循环),于FAM通道采集信号。
结果分析:通过Ct值判定病毒含量,阳性对照需出现典型扩增曲线,阴性对照无信号。
注意事项
仅限科研使用,不可用于临床诊断。
避免反复冻融试剂,分装后使用。
实验环境需严格分区(试剂准备区、样本处理区、扩增区)以防止污染。
质量控制
阳性对照Ct值≤35为有效实验;阴性对照无扩增。
若样本Ct值≥40或无扩增曲线,建议重复检测。
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