人腺病毒F40型染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Human Adenovirus F40 (HAdV-F40) Dye-Based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR2651
检测原理
本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，针对人腺病毒F40型基因组高度保守区域设计特异性引物，通过实时监测荧光信号变化，实现对病毒核酸的定性和定量检测。检测灵敏度可达100拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级。
产品组成
预混液：含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及荧光染料。
引物混合液：优化设计的特异性引物。
阳性对照：无传染性的HAdV-F40 DNA片段（用于标准曲线制备）。
阴性对照：无核酸酶水。
自备试剂与仪器
自备试剂：待测样品DNA模板（建议纯度A260/A280为1.8-2.0）。
适用仪器：
ABI 7500/QuantStudio系列
安捷伦MX3000P/3005P
Roche LightCycler
Bio-Rad CFX系列
Eppendorf RealPlex4
操作步骤
1. 标准曲线制备
将阳性对照DNA片段梯度稀释（10^2-10^7拷贝/μL），分装至标记管中。
每管取5μL稀释液作为模板，与15μL预混液混合。
2. 样品检测
反应体系（20μL）：
预混液10μL
引物混合液2μL
模板DNA 5μL
无核酸酶水补至20μL。
PCR程序：
预变性：95℃ 3分钟
循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
结果判读
定性检测：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。
定量检测：根据标准曲线计算样品拷贝数。
注意事项
操作需在无菌环境下进行，避免交叉污染。
试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融。
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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